RNAi沉默Notch1基因对人骨肉瘤细胞MG63的促凋亡作用  

作　　者：吴德明[1] 杨志强[1] 刘翔[1] 江川[1] 戴闽[1] 

机构地区：[1]南昌大学第一附属医院,南昌330006

出　　处：《山东医药》2013年第4期36-38,共3页Shandong Medical Journal

摘　　要：目的采用RNA干扰(RNAi)技术抑制Notch1基因的表达,观察阻断Notch信号通路对人骨肉瘤细胞MG63的促凋亡作用及其机制。方法构建mNotch-1短发夹状RNA(mNotch-1 shRNA),利用MTT增殖试验分析mNotch-1 shRNA转染前及转染24、48、72 h时MG63细胞的增殖情况;通过Annexin V法染色和流式细胞术检测细胞凋亡率及与mNotch-1 shRNA作用时间的关系;Western blot检测细胞中Notch1、Bcl-2及Bax蛋白表达的变化。结果与对照组相比,mNotch-1 shRNA转染MG63细胞后,细胞增殖水平明显下降。Annexin V染色后流式细胞仪检测可见实验组细胞凋亡率较对照组明显升高。Western blot结果分析显示mNotch-1 shRNA转染MG63细胞后,细胞中Notch1基因表达明显降低,并且显著抑制Bcl-2基因和上调Bax基因的表达。结论 RNAi沉默Notch1基因能明显抑制人MG63细胞增殖,促进细胞凋亡;其作用机制可能与调控Bcl-2及Bax蛋白表达有关。

关 键 词：骨肉瘤 RNA干扰 NOTCH1基因 细胞凋亡 

分 类 号：R738.1[医药卫生—肿瘤]