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作 者:张振宇[1] 侯祥红[2] 孟姗姗[1] 李丹[1] 张向楠[1] 李彬[1] 王基野[1] 柯涛[1] 张文斌[1] 骆文静[1]
机构地区:[1]第四军医大学军事预防医学院劳动与环境卫生学教研室,陕西西安710032 [2]第四军医大学营养与食品卫生学教研室,陕西西安710032
出 处:《现代生物医学进展》2013年第20期3835-3839,共5页Progress in Modern Biomedicine
基 金:国家自然科学基金项目(81001232&81172621)
摘 要:目的:细胞冻存、移植器官保存过程中,机体细胞会产生细胞寒冷应激过程,导致细胞产生损伤作用,而其作用机制尚不清楚,本研究通过观察4℃冷暴露对HEK293细胞增殖活性及凋亡的影响,分析线粒体分裂蛋白Drp1在此过程中的表达变化,阐明Drp1在细胞寒冷应激中作用及其机制。方法:采用MTT法观察4℃环境暴露对HEK293细胞损伤的影响,流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot方法检测蛋白Drp1、Bcl2表达水平变化,提取线粒体观察线粒体中Drp1表达水平。结果:4℃冷暴露抑制HEK293细胞增殖(P<0.05),Drp1线粒体表达水平增高,并向线粒体转位;丙酮酸可以逆转4℃冷暴露对细胞增值抑制,抑制Drp1线粒体表达水平增高,并向线粒体转位,增加细胞中Bcl2表达水平。结论:研究发现细胞寒冷应激可以使细胞凋亡,细胞增殖出现显著抑制,而寒冷应激引起细胞Drp1的线粒体转位,丙酮酸干预后可以对细胞起到保护作用,研究发现丙酮酸可以逆转Drp1的线粒体转位过程,增加Bcl2表达水平,可能是其产生保护作用的机制之一。Objective: To observe HEK293 cell proliferation after 4 ~C cold exposure and investigate the role of mitochondrial fission protein Drpl in this process. Methods: MTT assay method was used to detect the HEK293 cell damage after cold stress, flow cytometry method assay for cell apoptosis; Western blot was used to detect protein Drpl and Bcl2 expression level changes, observed mitochondrial Drpl expression levels in extracted mitochondria. Results: 4 ~C cold exposure inhibited the proliferation of HEK293 cells and increased the Drpl mitochondrial expression levels, and mitochondrial translocation; pyruvate can reverse the inhibition of cell proliferation, inhibition of Drpl mitochondrial expression levels, and mitochondrial translocation, increased Bcl2 expression level. Conclusion: Cells cold stress can cause Drpl mitochondrial translocation, cell apoptosis, and pyruvate can reverse Drpl mitochondrial transloeation and increase Bcl2 expression level. This process can play a protective effect on cells.
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