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出 处:《南通大学学报(医学版)》2013年第4期270-273,共4页Journal of Nantong University(Medical sciences)
基 金:南通市应用研究计划资助项目(K2010046)
摘 要:目的 :研究卵巢癌中抑癌基因p27kip1蛋白在不同细胞周期中的亚细胞定位及表达形式,分析其对卵巢癌细胞周期调控的作用机制。方法:以人卵巢癌细胞株SKOV3为研究对象,用血清饥饿法同步细胞周期,采用免疫荧光法测定不同细胞周期中p27kip1、p-Ser10p27kip1蛋白的表达定位情况,并用Western Blot法检测p27kip1、p-Ser10p27kip1在不同细胞生长周期的表达。结果:在G0/G1期卵巢癌细胞中,p27kip1定位表达于细胞核,发挥抑制细胞周期的活性的作用。在S期细胞中,p27kip1以p-Ser10p27kip1的形式存在于胞质中。p27kip1的表达水平随着血清释放的时间延长而逐渐减少。p-Ser10p27kip1表达水平随着血清释放的时间延长而逐渐增加。结论:p27kip1定位于卵巢癌细胞核,抑制细胞周期活化,并以磷酸化的形态转移出核,丧失抑癌活性。Objective: To explore the subcellular localization and the expression of p27^kip1 protein in different cell cycle of ovarian carcinoma.Methods: We take the human ovarian cancer cell line SKOV3 as the object of the research.With the serum starvation method we synchronize the cell cycle.Then we detected the localization of p27^kip1 and p-Ser10p27^kip1 protein by immunofluorescence assay.At last we use immunoblotting method to check the expression of p27^kip1 and p-Ser10p27^kip1 in different cell cycles.Results: In the G0/G1 phase cells,p27^kip1 protein localized in the cell nucleus and inhibited the activiation of cell cycles,while in the S phase cells,it was phosphorylated in cytoplasm as p-Ser10p27^kip1.The expression level of p27^kip1 decreased with the time of serum releasing,which opposite to the p-Ser10p27^kip1.Conclusion: The p27^kip1 protein localized in the cell nucleus and inhibited the activiation of cell cycles.It was transported outside of the cell nucleus with the phosphorylated form and lost its function.
关 键 词:卵巢癌 细胞周期 P27KIP1 p-Ser10p27kip1
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