荧光定量聚合酶链反应检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因的表达水平及临床应用  

作　　者：杨晏[1] 李科[1] 王忠诚[1] 

机构地区：[1]重庆市急救医疗中心检验科,重庆400014

出　　处：《第三军医大学学报》2013年第16期1758-1760,共3页Journal of Third Military Medical University

摘　　要：目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)mecA基因的表达水平及临床价值。方法系统研究了FQ-PCR法检测MRSA mecA基因的灵敏度、重复性、定量范围和扩增效率。采用FQ-PCR法检测临床分离的103株金黄色葡萄球菌,并与传统PCR法和苯唑西林纸片扩散法检测结果相比较。结果 FQ-PCR法检测MRSA mecA基因的批内CV为3.1%,批间CV为4.7%,灵敏度1.0×103拷贝数/mL,定量范围(1.0×103～1.0×106)拷贝数/mL,扩增效率84.8%。与传统PCR法相比较,FQ-PCR法检测MRSA mecA基因的Kappa值为0.95,敏感度94.9%,特异度99.1%,阳性预测值97.4%,阴性预测值98.3%。103株金黄色葡萄球菌中,FQ-PCR法检出mecA基因阳性37株、阴性66株,mecA基因的表达水平为(3.72±2.83)×105拷贝数/mL,表达阳性率35.9%;苯唑西林纸片扩散法检出MRSA 27株、MSSA 76株,MRSA阳性率26.2%,FQ-PCR法的检出率显著高于苯唑西林纸片扩散法(P<0.01)。结论 FQ-PCR是一种敏感、特异的定量检测MRSA mecA基因的方法,在MRSA的快速、准确鉴定中具有重要的临床应用价值。

关 键 词：荧光定量聚合酶链反应 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MECA基因 表达水平 

分 类 号：R394.3[医药卫生—医学遗传学] R378.11[医药卫生—基础医学]