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机构地区:[1]天津医科大学口腔医院牙体牙髓科,天津300070 [2]首都医科大学附属北京友谊医院口腔科,北京100050
出 处:《牙体牙髓牙周病学杂志》2013年第8期523-527,共5页Chinese Journal of Conservative Dentistry
基 金:国家自然科学基金面上项目(81271164);天津市高等学校科技发展基金计划项目(20110139)
摘 要:目的:研究TNF-α及LPS刺激下牙周膜干细胞IκB磷酸化及其下游基因的表达。方法:体外分离、培养人牙周膜干细胞,分别在10 ng/mL TNF-α和500 ng/mL Ecoli.LPS刺激下进行培养,并于刺激培养即时(0 h)、5、30 min和1、2 h,采用Western Blot法检测IκBα总蛋白和磷酸化IκBα蛋白的表达变化;Real-time PCR检测IL-6、IL-8 mRNA的表达水平。结果:牙周膜干细胞在10 ng/mL TNFα或500 ng/mL Ecoli.LPS刺激下培养0~2 h不同时间后,IκBα总蛋白随刺激时间逐渐降低,1 h时最低;磷酸化IκBα随刺激时间逐渐升高,2 h时最高;NFκB的下游基因IL-6及IL-8mRNA表达水平均随刺激时间逐渐升高,2 h时升高最明显(P<0.05)。结论:炎症细胞因子TNF-α或LPS均可促进牙周膜干细胞中IκBα蛋白的磷酸化,并上调IL-6、IL-8 mRNA的表达;提示NFκB信号通路的活化可能是导致炎症状态下牙周膜干细胞功能损害的重要因素。AIM: To investigate phosphorylation of IkB and the expression of downstream genes in TNF-α or Ecoli. LPS stimulated periodontal ligament stem cells (PDLSCs). METHODS: Human PDLSCs wrer cultured and stimulated by recombinant human IkBα at 10 ng/mL and Ecoli. LPS at 500 ng,/mL respectively. Western Blot analysis was used to detect the total protein and the phosphorylated protein of IkBα, real-time PCR was used to detect IL-6 and IL-8 mRNA expression. RESULTS: l0 ng/mL TNFct or 500 ng/mL Eeoli. LPS decreased the total protein, increased the phosphorylated protein of IkBα and increased L-6 and IL-8 mRNA expression time-dependently in 0 - 2 h expo- sure. CONCLUSION: TNFoL or LPS may activate IkB phosphorylation, NFKB signaling pathway might play a role in the dysfunction of PDLSCs in inflammatory condition.
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