高级糖基化终末产物对人视网膜色素上皮细胞的作用机制研究  

Advanced glycosylation end products and human retinal pigment epithelium cells

作　　者：黄焱[1] 周敏[1] 郑卫东[2] 徐国兴[2] 

机构地区：[1]福建医科大学医学技术与工程学院眼视光学系,福州350004 [2]福建医科大学附属第一医院眼科

出　　处：《中华眼底病杂志》2013年第5期510-513,共4页Chinese Journal of Ocular Fundus Diseases

基　　金：福建省自然科学基金（2011J01190）

摘　　要：目的探讨高级糖基化终末产物（AGEs）对人视网膜色素上皮（RPE）细胞的作用机制。方法原代培养人RPE细胞，在传代细胞生长状态良好的情况下，无血清的Dulbecco改良Eagle培养基同步化24h，进行分组：（1）C组：BSA浓度为0．1g／L，各作用24、48h，分别为c-、cz组；（2）NC组：葡萄糖浓度为5．6mmol／L，各作用24、48h，分别为NC1、NC2组；（3）A组：AGEs浓度分别为0．1、0．2、0．4g／L，各作用24、48h，作用24h依次为A。组、A。组、A。组，作用48h依次为A。组、A5组、A6组。免疫组织化学检测AGEs受体（RAGE）、过氧化物酶体增生物激活受体γ辅助激活因子-1a（PGC—1a）和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达；激光共聚焦显微镜检测核因子-κB（NF-κB）的活化。通过图像分析软件IPP6．0和统计软件SPSS17．0进行定量分析。结果A组RPE细胞较c组和NC组RAGE、PGC-1a和VEGF蛋白的表达明显增加，且随着AGEs浓度的升高和刺激时间的延长而增加（F=294．5、228．3、241．5，P〈O．05）；随着AGEs浓度的升高和刺激时间的延长，NF-κB的活化增加。结论AGEs的堆积可导致其受体RAGE在RPE细胞表达增加，并促进核转录共同激活因子PGc-1a蛋白的表达和NF—κB的活化，促进RPE细胞VEGF的分泌。Objective To study the effect of advanced glycosylation end products （AGEs） on human retinal pigment epithelium （RPE） cells. Methods Human primary RPE cells were cultured in basal and different concentrations of AGEs with different times. The cells were divided into several groups as follows： group C （control）： bovine serum albumin 0.1 g/L, 24 hours （C1） and 48 hours （C2）; group NC （normal control） .- basal culture medium with 5.6 mmol/L of glucose, 24 hours （NC1） and 48 hours （NC2） ; group A （AGEs） ： 0. 1 g/L, 24 hours and 48 hours, A1 and A4; 0. 2 g/L, 24 hours and 48 hours, A2 and As ; 0. 4 g/L, 24 hours and 48 hours, A3 and A~. Immunohistochemistry analysis was used to study the protein expression of receptor for AGEs （RAGE）, peroxisome proliferative-activated receptor-gamma coactivator-i alpha （PCG -la） and vascular endothelial growth factor （VEGF） protein. The activation of nuclear factor-kappa B （NF-κB） was detected by confocal microscope. Software IPP6.0 and SPSS 17.0 were used to analyze the quantitation data. Results Immunohistochemistry analysis showed that RAGE protein, PGC-1a protein and VEGF protein were basally secreted in RPE cells, but AGEs can obviously increases the expression level of these proteins （F = 294.5, 228.3, 241.5; P＇（ 0. 05）. Confocal microscope demonstrated that AGEs increased the activation of NF-~B significantly. Conclusion Accumulation of AGEs can stimulate the expression of RAGE protein, PGC-la protein and VEGF protein, activation of NF-κB and induce apoptosis of RPE cells.

关 键 词：糖基化终产物 高级 药理学 视网膜色素上皮 过氧化物酶体增殖物激活受体 NF-ΚB 

分 类 号：R774.1[医药卫生—眼科]