偶氮硝羧-Sr(Ⅱ)β型配合物检测胃蛋白酶的研究  

Determination of pepsin by the β-complex of carboxynitroazo-Sr( Ⅱ)

作　　者：冯爱青[1] 胡秋娈[2] 程彦伟[1] 王瑞[2] 刘尚才[3] 

机构地区：[1]洛阳师范学院生命科学系,洛阳471022 [2]洛阳师范学院化学化工学院,洛阳471022 [3]洛阳正骨医院,洛阳471002

出　　处：《分析试验室》2013年第10期11-14,共4页Chinese Journal of Analysis Laboratory

基　　金：国家自然科学基金-河南人才培养联合基金(U1204307);河南省科技厅科技攻关重点项目(102102110154);河南省教育厅自然科学研究计划项目(2011A150020)资助

摘　　要：在pH2.6的Clark-Lubs缓冲介质中,紫红色的偶氮硝羧λmax为545 nm,与金属Sr(Ⅱ)生成稳定的β型蓝色配合物,其λmax为717 nm,红移172 nm。蛋白质(HSA)能与该配合物形成紫红色三元复合物,发生消光反应,吸光度呈对应波长下的负吸收。实验确定了反应的最佳条件,测定了有可能干扰的物质,探讨其β型配合物对不同蛋白质的响应情况,发现胃蛋白酶有较大灵敏度,ε=5.16×105L·mol-1·cm-1,在10～50μg/mL范围内遵循比尔定律。建立了以偶氮硝羧-Sr(Ⅱ)β型配合物与蛋白质发生褪色反应测定蛋白质含量的光度分析新方法,用于胃液中蛋白酶的测定,结果和经典方法吻合。In Clark-Lubs buffer at pH 2. 6,the purple organic reagent carboxynitroazo could bind with Sr（ Ⅱ） to form a blue β-complex,which presents a maximum absorption at 717 nm with withe a red shift of 172 nm compared to carboxynitroazo itself. And the β-complex could combine with protein（ HSA） to form a purple ternary complex. Its apparent molar absorptivity and linear range were 5. 16 × 105L·mol- 1·cm- 1（ 708 nm）and 10 ～ 50 μg / mL（ pepsin）. A new method for the determination of proteins by using the fading reaction of the β-complex of carboxynitroazo-Sr（ Ⅱ） and protein was established under the optimal conditions. The methtod has been used for the determination of pepsin with satisfactory results.

关 键 词：分光光度法 褪色反应 偶氮硝羧-Sr(Ⅱ) 胃蛋白酶 

分 类 号：O657.3[理学—分析化学] R446.1[理学—化学]