大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体的构建及其在蛋白酶基因表达中的应用  

Construction of a Versatile Escherichia coli-Bacillus subtilis Shuttle Vector and Its Application in Protease Gene Expression

作　　者：杨键[1,2] 游志庆[1,2] 麦志茂[1,2] 李洁[1] 田新朋[1] 张偲[1,2] 

机构地区：[1]中国科学院南海海洋研究所中国科学院海洋生物资源可持续利用重点实验室,广州510301 [2]中国科学院研究生院,北京100049

出　　处：《生物技术通报》2013年第9期146-150,共5页Biotechnology Bulletin

基　　金：国家“973”计划项目(2010CB833804);国家“863”计划项目(2012AA092104);海洋公益性行业科研专项(201305018)

摘　　要：利用基因重组技术,以枯草杆菌表达载体pWB980为骨架,插入大肠杆菌的克隆载体pUC18中的抗性基因和复制子,构建穿梭质粒pY980coli。将海洋细菌蛋白酶基因hspa插入pY980coli载体P43启动子下游,导入枯草杆菌WB600中,可实现活性表达。A versatile Escherichia coli-Bacillus subtilisshuttle vector pY980coli was constructed by genetic recombination.Resistance gene and replicon of pUC18,a cloning vector forEscherichia coli,were integtated into theBacillus subtilisexpression plasmid pWB980.Protease genehspafrom a marine bacterium was then inserted under P43 promoter of pY980coli,and the recombinant vector was transformed intoBacillus subtilisWB600.Protease activity was detected in the fermentation broth.

关 键 词：穿梭载体 P43启动子 枯草芽孢杆菌表达系统 蛋白酶 分泌表达 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]