穿梭载体

作品数：117被引量：186H指数：7
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利用大肠杆菌-农杆菌-酵母三元穿梭载体快速构建辣椒斑驳病毒杭州分离株侵染性克隆
《农业生物技术学报》2025年第2期443-452,共10页赵薇 张灿 付康 马宁 葛家成 孙凯 俞晓平 
国家自然科学基金面上项目(32472649);浙江省属高校基本科研业务费(2022YW04)。
辣椒斑驳病毒(Pepper mottle virus,PepMoV)是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的成员,能够侵染辣椒(Capsicum annuum)、番茄(Solanum lycopersicum)等重要茄科作物。本研究利用小RNA测序技术,在浙江省杭州市的辣椒样品中成功检测到PepMoV。通...
关键词：辣椒斑驳病毒 酵母体内重组 基因组 侵染性克隆 反向遗传学 
利用无缝克隆方法构建埃及伊蚊表皮蛋白基因AaCPR100A双向启动子苏云金芽孢杆菌穿梭载体
《中国热带医学》2023年第11期1141-1145,1163,共6页马晨昕 张莹心 刘思寒 何佳利 陈久凯 张文飞 廖承红 韩谦 
国家自然科学基金项目(No.31960703,No.U22A20363);海南省重大科技计划项目(No.ZDKJ2021035)。
目的 构建表达dsRNA的双向启动子以及靶基因AaCPR100A的大肠杆菌-苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT315-AaCPR100A。方法 以苏云金芽孢杆菌pSVP27A质粒为模板通过PCR扩增苏云金芽孢杆菌Cry3A正向启动子Pro-1(+);以埃及伊蚊RNA反转为cDNA为模板...
关键词：埃及伊蚊 无缝克隆 AaCPR100A 苏云金芽孢杆菌 dsRNA 
嗜酸乳杆菌质粒的分析和穿梭载体的构建被引量：1
《食品工业科技》2023年第13期127-133,共7页顾斌涛 郭建军 曾静 聂俊辉 王通 熊大维 魏国汶 袁林 
江西省重点研发计划(20212BBF63022);江西省重点研发计划(20192BBFL60020);江西省科学院省级科技计划项目包干制试点示范项目重大产业技术攻关项目(2021YSBG10005)。
为分析嗜酸乳杆菌内源性质粒pDX,并基于该质粒构建大肠杆菌-嗜酸乳杆菌穿梭载体。本研究从嗜酸乳杆菌XW118中分离获得内源性的质粒pDX,对其进行序列测定及功能分析,然后利用质粒pDX的复制子构建了能在大肠杆菌和乳酸菌中穿梭的载体,并...
关键词：穿梭载体 嗜酸乳杆菌 质粒 乳酸菌 转化效率 
副干酪乳酪杆菌ZY-1内源性质粒分析及其表达系统的构建与应用被引量：2
《生物工程学报》2023年第3期1217-1231,共15页肖路遥 石婷婷 王苏滢 赵庆尧 李伟 
国家自然科学基金(31871771,U1903108);江苏省自然科学基金(BK20201320)。
高效稳定的乳杆菌表达载体的构建是实现其菌种改良和个性化菌株开发的关键。本研究从副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei) ZY-1中分离出4个内源性质粒并进行功能分析。通过将pLPZ3与pLPZ4的复制子rep,与pNZ5319质粒的氯霉素...
关键词：副干酪乳酪杆菌 内源性质粒 穿梭载体 表达载体 
甘蓝型油菜BnaLPAT4基因功能研究
《核农学报》2022年第8期1537-1545,共9页刘勇 肖旦望 秦艺 陈静 陈婉瑜 熊兴华 
转基因重大专项(SQ2018ZD080068);国家重点研发计划项目(2017YFD0101703)。
为了验证油菜溶血磷脂酸酰基转移酶4(BnaLPAT4)在油脂合成中的作用,本试验通过同源克隆法从甘蓝型油菜湘油15号中获得2条全长分别为1143、1140 bp的BnaLPAT4基因,分别命名为BnaLPAT4-1和BnaLPAT4-2,构建pGAL::BnaLPAT4-1和pGAL::BnaLPAT...
关键词：拟南芥 BnaLPAT4 酵母穿梭载体 脂肪酸分析 气相色谱-质谱法 
粪肠球菌内源性质粒的序列分析及其穿梭载体的构建被引量：2
《食品工业科技》2021年第23期141-149,共9页袁林 曾静 郭建军 魏国汶 
国家自然科学基金地区科学基金项目(32060772);江西省杰出青年基金项目(20202ACBL215001);江西省重点研发计划项目(20192BBFL60020)。
为了对粪肠球菌EXW27的内源性质粒pXW进行DNA序列的测定和分析,并基于其最小复制子构建大肠杆菌-粪肠球菌穿梭载体。本研究从具有优良益生特性的粪肠球菌EXW27中分离得到了内源性质粒pXW,对其进行了DNA序列的测定及分析,然后利用质粒pX...
关键词：粪肠球菌 内源性质粒 θ型复制 穿梭载体 大肠杆菌 
利用酵母同源重组系统快速构建柑橘叶斑驳病毒的侵染性克隆被引量：3
《中国农业科学》2018年第9期1695-1705,共11页崔甜甜 晏建红 宾羽 李中安 周常勇 宋震 
国家重点研发计划(2017YFD0202002);重庆市两江学者计划项目;国家重点研发计划政府间国际科技创新合作重点专项(2017YFE0110900)
【目的】构建柑橘叶斑驳病毒(Citrus leaf blotch virus,CLBV)中国分离株的侵染性克隆,为从分子水平解析其致病机理打下基础。【方法】以Gene Art?p YES1L Vector为模板,PYES2117F、PYES2117R为引物扩增含有酵母相关复制起始位点的片段p...
关键词：酵母同源重组 柑橘叶斑驳病毒 三元穿梭载体 侵染性克隆 
miR-181a重组穿梭载体的构建及其对人骨肉瘤细胞迁移侵袭能力的影响
《福建医药杂志》2018年第1期123-125,共3页范丽娟 苏奇 李建龙 高曦 
2015年福州市科技计划项目(2015-S-141-9)
目的探讨miR-181a对人骨肉瘤细胞迁移侵袭能力的影响。方法通过构建miR-181a重组穿梭载体,并将其转染到人骨肉瘤细胞MG63中,以Transwell实验检测人骨肉瘤细胞MG-63的迁移和侵袭能力。结果 pGV314-miR-181a重组穿梭载体组相对于空白对照...
关键词：miR-181a 重组穿梭载体 人骨肉瘤细胞 迁移 侵袭 
大肠埃希氏菌-胸膜肺炎放线杆菌穿梭载体构建
《中国兽药杂志》2017年第8期1-5,共5页李建 张磊 张媛 彭国瑞 王秀丽 刘博 辛凌翔 罗玉峰 蒋玉文 
国家重点研发计划资助项目(2016YFC1202303)
合成胸膜肺炎放线杆菌质粒pKMA2425上长度为126 bp及2214 bp的2个DNA片段,克隆到大肠埃希氏菌质粒pGSI中,获得重组质粒pGSIA。PCR扩增pTKRED上的大观霉素抗性基因及线性化的pGSIA(126 bpDNA片段-pGSI-2214 bpDNA片段),连接,电转化胸膜...
关键词：大肠埃希氏菌 胸膜肺炎放线杆菌 穿梭载体 
鸭瘟重组病毒穿梭载体的构建及分析被引量：1
《实验动物科学》2017年第3期16-19,23,共5页刘柏含 牛银杰 赵丽丽 弥春霞 陈洪岩 
黑龙江省地方科技攻关计划课题(No.2014QA3BN002);黑龙江省自然科学基金重点项目(No.ZD2016006)
目的本研究目的为构建重组穿梭载体,拯救带有增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)重组病毒,为重组二联苗的研制奠定基础。方法选择已经证实的US区域的US2-SORF3、US7-US8和UL区域中的UL15-UL18的非编码区作为...
关键词：鸭瘟病毒 穿梭载体 噬斑纯化 
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