短肽库中VEGF受体拮抗剂的筛选及生物学活性鉴定  

作　　者：安平[1] 孟麟[1] 董志伟[2] 寿成超[1] 

机构地区：[1]北京医科大学临床肿瘤学院,北京100034 [2]中国医学科学院肿瘤医院,北京100021

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》2000年第6期803-808,共6页Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology

基　　金：国家杰出青年科学基金!资助项目 (395 2 5 0 2 1)

摘　　要：为获得可溶性血管内皮细胞生长因子受体 (s VEGFR,soluble VEGF receptor)的拮抗剂 ,以固相化可溶性 VEGF受体 s Flt- 1和 s KDR通过生物淘选筛选噬菌体十二肽库 .采用 ELISA及竞争性 ELISA筛选阳性克隆 ,12 5I- VEGF竞争性放射免疫吸附实验进一步鉴定阳性克隆的体外结合活性 .经过 3～ 4轮生物淘选的短肽库有明显富集 .初筛后约 3%的噬菌体克隆可同时结合相应的可溶性受体及人脐静脉内皮细胞 .其中 6个克隆与内皮细胞的结合 ,可以部分地被变性复性处理的原核表达血管内皮细胞生长因子 (VEGF)竞争抑制 .4个噬菌体克隆可竞争性抑制 12 5I- VEGF与可溶性受体的体外结合反应 .两个 KDR阳性克隆 K2 37与 K93可在体外抑制内皮细胞的增殖 .克隆K2 37与 F90可抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管形成 .阳性克隆可作为血管内皮细胞生长因子受体拮抗剂 ,具有良好的应用前景 .

关 键 词：血管内皮细胞生长因子 肿瘤 噬菌体肽库 

分 类 号：R730.2[医药卫生—肿瘤] Q516[医药卫生—临床医学]