肿瘤相关抗原GC结合因子2 shRNA表达载体的构建及鉴定  

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作  者:李金平[1] 晁耐霞[1] 蒋日婷[1] 马平[1] 陈德凤[1] 陈力[1] 吴博[1] 黄天明[1] 莫发荣[1] 罗国容[1] 

机构地区:[1]广西医科大学组胚教研室

出  处:《细胞与分子免疫学杂志》2013年第12期1288-1291,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基  金:国家自然科学基金(8106016);广西自然科学基金(2010GXNSFD013048)

摘  要:GC结合因子2(GC-binding factor 2, GCF2)是一种转录抑制因子, 因为能与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)基因启动子上富含GC的序列结合而得名。研究表明, GCF2可通过多种途径参与细胞增殖、 细胞周期调控及细胞凋亡等进程。GCF2广泛地高表达于肺癌A549细胞、 胃腺瘤AGS细胞及白血病K562细胞等人类多种肿瘤细胞, 并且发现GCF2在这些细胞中的高表达与肿瘤细胞增殖、 侵袭及肿瘤耐药等密切相关。RNA干扰(RNA interence, RNAi)可特异性地阻断靶基因表达, 是研究基因功能的有效技术。我们的前期研究表明, GCF2是一种肿瘤相关抗原, 在HepG2等肝癌细胞株中高表达[8]。本实验设计针对GCF2 mRNA的干扰序列, 并且与真核表达载体pGPU6/GFP/Neo重组而构建重组质粒pGPU6/GFP/Neo-GCF2, 经酶切和测序鉴定后, 将该重组质粒转染肝癌细胞株HepG2, 以实现对GCF2表达的抑制, 为进一步研究GCF2对肝癌细胞生物学行为的影响及可能的作用机制奠定基础。

关 键 词:GC结合因子2 小发夹RNA(shRNA) 肝细胞癌 质粒 

分 类 号:R735.7[医药卫生—肿瘤] R392-33[医药卫生—临床医学]

 

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