一步柱层析纯化螺旋藻藻蓝蛋白  

A singel step chromatography for the purification of phycocyanin from Arthrospira platensis

作　　者：邵明飞[1,2] 赵楠[3] 李勇勇[3] 谷洋洋 刘兆普[1] 秦松[1,2] 

机构地区：[1]南京农业大学 资源与环境科学学院江苏省海洋生物学重点实验室,南京210095 [2]中国科学院烟台海岸带研究所 生物资源实验室,烟台264003 [3]曲阜师范大学化学与化工学院,曲阜273165 [4]汕头大学理学院生物系,汕头515041

出　　处：《生物学杂志》2013年第5期59-63,共5页Journal of Biology

基　　金：国家自然科学基金(41176144);国家科技支撑计划项目(2013BAB01B01);国家海洋公益性行业科研专项经费项目(201205027、200905021-3);山东省自然科学杰出青年基金资助项目(JQ200914);广东省中国科学院全面战略合作项目(2011A090100040)

摘　　要：采用硫酸铵盐析结合疏水层析技术分离纯化螺旋藻中的藻蓝蛋白。试验结果表明,在磷酸盐缓冲体系下藻蓝蛋白粗提液经1.25 mol/L硫酸铵盐析处理后离心脱气,只需采用一步Macro-Prep Methyl疏水层析,藻蓝蛋白的纯度(A620/A280)可提高到4.017,回收率为19.38%。特征吸收峰和荧光光谱证实纯化后的产物符合藻蓝蛋白的性质,Native-PAGE电泳只出现单一染色带,表明纯化得到的藻蓝蛋白是均一的;SDS-PAGE电泳出现分子量为15.4kDa、17.3 kDa的2条染色带,分别为藻蓝蛋白的α亚基与β亚基。This paper discussed a novel purification method of phycocyanin from Arthrospira platensis using hydrophobic interaction chromatography. Ammonium sulfate was gradually added to the crude extract of phycocyanin to make the ammonium sulfate concentra- tion 1.25 mol/L. The sample was kept static for 12 h at 4℃ and then centrifuged. After degassing, the supernatant was purified by the single step of Macro-Prep Methyl hydrophobic interaction chromatography. The purity （A620/A280） was improved to 4. 017. The recov- ery of phycocyanin was 19. 38%. The UV-vis and fluoroscence spectra matched the characteristcis of phycocyanin. Result of Native- PAGE indicated phycocyanin was homogenious. Molecular weights of the two bands in SDS-PAGE recoganized as a subunit and β sub- unit of phycocyanin were 15.4 kDa and 17.3 kDa, respectively.

关 键 词：藻蓝蛋白 纯化 Macro-Prep METHYL NATIVE-PAGE SDS-PAGE 

分 类 号：Q946.1[生物学—植物学]