野生型低氧诱导因子1α对人微血管内皮细胞增殖、迁移及成管的影响  

Effects of wild-type hypoxia-inducible factor lot on human microvascular endothelial cell proliferation, migration and tube formation in vitro

作　　者：刘城[1] 吴平生[1] 王月刚[1] 裴静娴[1] 赖艳娴[1] 

机构地区：[1]广州医科大学广州市第一人民医院心血管内科,510180

出　　处：《中华生物医学工程杂志》2013年第4期261-265,共5页Chinese Journal of Biomedical Engineering

基　　金：国家自然科学基金（81100235）;广东省自然科学基金（S2011040004458）;广州市科技计划重点项目：2012J4100035）

摘　　要：目的研究野生型低氧诱导因子1a（HIF．1et）对人微血管内皮细胞（HMVEC．L）增殖、迁移、成管的影响，并初步探讨其作用机制。方法实验分正常对照组、物理低氧组及野生型HIF．1a基因组，分别用MTS法、划痕法、成管法检测前述3组HMVEC．L增殖、迁移、成管的能力，并用Westem印迹测定HIF-1a及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平。结果MTS法结果显示，野生型HIF—1a基因转染HMVEC—L后明显促进HMVEC—L增殖，与正常对照组、物理低氧组差异有统计学意义（P〈0．05）。划痕结果显示，正常对照组、物理低氧组、野生型HIF—1a基因组HMVEC．L迁移率分别为（1．09±0．25）％、（8．65±1．03）％及（17．12±1．97）％，其中野生型HIF．1a基因组迁移率最大（P〈0．05）。成管法结果显示，正常对照组、物理低氧组、野生型HIF-1a基因组成管长度分别为（0．34±0．07）、（0．90±0．16）、（1．76±0．09）mm／视野，其中野生型HIF—1a基因组成管长度最长（P〈0．05）。Western印迹结果显示，与正常对照组相比，物理低氧组、野生型HIF．1et基因组HIF．1a、VEGF蛋白表达均明显升高（P〈0．05），其中野生型HIF—1a基因组HIF—1a、VEGF蛋白表达水平最高（均为P〈O．05）。结论野生型HIF．1a基因能在体外促进HMVEC-L增殖、迁移、管样形成，是一种具有临床应用前景的血管新生基因。Objective To study the effects of wild-type hypoxia-inducible factor-la （HIF-la） on proliferation, migration and tube formation in vitro in human lung microvascular endothelial cells （HMVEC-Ls）. Methods The HMVEC-Ls were divided into normal control group, physical hypoxia group and HIF-la transfection group. The MTS, wound-healing migration, and Matrigel assays were employed to determine the proliferation, migration and tube formation, respectively. The protein expressions of HIF-let and VEGF were analyzed by Western blotting. Results Compared with normal control and physical hypoxia groups, transfection of HMVEC-L with wild-type HIF-let at day 3 resulted in pronounced HMVEC-L proliferation （P〈0.05）, a significantly augmented migration rate of the genome [ （1.09±0.25）% and （8.65±1.03）% vs （17.12±1.97）%, P〈0.05 ] and substantially increased length of tube [ （0.34±0.07） and （0.90±0.16） vs （1.76±0.09） mm/field, P〈0.05 ]. Western blotting assay evidenced significantly augmented HIF-let and VEGF expressions in physical hypoxia and wild-type HIF-lct groups （all P〈0.05）, particularly the latter. Conclusion Wild-type HIF-la promotes angiogenesis by facilitating HMVEC-L proliferation, migration and tube formation in vitro and is expected to be a promising target for therapeutic angiogenesis.

关 键 词：微血管 内皮细胞 新生血管化 生理性 

分 类 号：R363[医药卫生—病理学]