大鼠海马神经元原代培养方法及缺糖缺氧再灌注损伤模型的建立  

作　　者：宋宁宁[1] 宋丽 李剑[3] 刘向红[1] 

机构地区：[1]山东大学齐鲁医院,济南250012 [2]威海口腔医院 [3]济南市第五人民医院

出　　处：《山东医药》2013年第48期24-26,I0002,共4页Shandong Medical Journal

基　　金：山东省中医药科技发展计划项目(2009-151)

摘　　要：目的探讨大鼠海马神经元原代培养方法,并建立缺糖缺氧再灌注损伤模型。方法取新生48 h内的大鼠海马组织进行体外原代培养,并进行神经元鉴定。神经元培养第8天,分为对照组、缺糖缺氧组及再灌注损伤组。对照组换Earle's液正常培养;缺糖缺氧组换无糖Earle's平衡盐缓冲液培养并放入缺氧盒内,持续3 h缓慢通入95%的N2。再灌注损伤组经过与缺糖缺氧组相同处理后,换以完全培养基置入CO2培养箱孵育,模拟体内缺血再灌注的过程。倒置相差显微镜进行一般形态学的动态观察,采用MTT法测定神经元存活率。结果经过分类计数,神经元约占97.35%,可认为是较纯的神经细胞培养。对照组神经元存活率为100%,缺糖缺氧组为75.25%±3.12%,再灌注损伤组再灌注12、24 h的神经元存活率分别为63.64%±2.25%、55.37%±1.04%;再灌注损伤组再灌注12、24 h的神经元存活率与对照组和缺糖缺氧组比较,P均<0.05。结论成功体外培养海马神经元,并建立大鼠缺糖缺氧再灌注损伤模型。

关 键 词：海马神经元 原代培养 缺糖 缺氧 再灌注损伤 大鼠 

分 类 号：R361.3[医药卫生—病理学]