白木香3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(AsHMGS)基因的克隆与表达分析  被引量:12

Cloning and Gene Expression of 3-Hydroxy-3-Methylglutaryl-CoA Synthase Gene(AsHMGS) from Aquilaria sinensis(Lour.) Gilg

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作  者:刘娟[1] 徐艳红[1] 杨勇[2] 梁良[3] 高志晖[1] 杨云[2] 张争[1,2] 隋春[1] 魏建和[1,2] 

机构地区:[1]中国医学科学院&北京协和医学院,药用植物研究所,北京100193 [2]中国医学科学院&北京协和医学院,药用植物研究所海南分所,海南省南药资源保护与开发重点实验室,万宁571533 [3]山东中医药大学,济南250355

出  处:《植物研究》2014年第1期75-84,共10页Bulletin of Botanical Research

基  金:国家自然科学基金项目(81173481,31100220,31000136);北京协和医学院“新兴与交叉学科科研团队”项目(2012N07);2013年创新人才推动计划重点领域创新团队;2013年北京协和医学院研究生创新基金项目(2013-1007-07)

摘  要:以白木香(Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg)茎cDNA为模板,采用反转录PCR及RACE技术分离得到HMGS基因cDNA全长。序列分析表明该基因序列全长1 831 bp,共编码465个氨基酸,推导的蛋白质分子量为51.4 kD,理论等电点6.25,命名为AsHMGS。推导的AsHMGS蛋白质序列具有植物HMGS酶的典型结构,并预测出HMGS酶的活性中心。系统进化树分析表明,AsHMGS蛋白与拟南芥、琴叶拟南芥、芥菜的相应蛋白相似度最高,其次为人参、喜树和野茶树。荧光定量PCR结果显示,茉莉酸甲酯能诱导白木香AsHMGS的表达。Homologous HMGS gene cDNA was isolated from the stem of Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg through reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and rapid amplification of eDNA ends (RACE) technique, and named as AsHMGS. The nucleotide sequence of AsHMGS gene was 1 831 bp and contained an open reading frame (ORF) of 1 398 bp encoding 465 amino acids with a molecular weight of 51.4 kD, and the theoretical isoeleetric point was 6.25. Representative motifs of AsHMGS and active site were deduced in the amino acids sequence of AsHMGS. The results of phylogenetic analysis suggested that the protein sequence of AsHMGS had high similarity to that of Arabidopsis thaliana, Arabidopsis lyrata subsp, lyrata, and Brassica juncea, followed by Camellia sinensis, Camptotheca acuminate, and Panax ginseng. The results of real-time PCR showed that the transcription of AsHMGS could be induced by methyl jasmonate.

关 键 词:白木香 HMGS基因 序列分析 表达分析 

分 类 号:Q949.761.1[生物学—植物学]

 

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