ASM真核表达载体的构建与鉴定  

作　　者：王凯[1] 张百红[1] 陈龙[1] 王海忠[1] 

机构地区：[1]兰州军区兰州总医院肿瘤科,兰州730050

出　　处：《陕西医学杂志》2014年第1期98-100,共3页Shaanxi Medical Journal

基　　金：兰州军区医学科研课题资助项目(No 2012-06)

摘　　要：目的:构建含有酸性鞘磷脂酶(Acid sphingomyelinase,ASM)融合基因片段的质粒,并在真核细胞中表达、鉴定。方法:由人淋巴结cDNA文库中扩增基因片段,将ASM基因插入真核表达载体pEGFP-N1中,获得融合基因构建真核表达载体ASM-pEGFP-N1。以其瞬时转染Hela细胞,应用免疫印迹与流式细胞术检测融合蛋白与绿色荧光蛋白的表达。结果:正确获得ASM融合基因,DNA序列分析表明所构建的含ASM融合基因的质粒与设计相同,融合蛋白与绿色荧光蛋白均正确表达。结论:成功构建了含有ASM融合基因的真核表达载体,并在真核细胞中正确表达,为进一步研究肿瘤与ASM表达之间的关系奠定了基础。

关 键 词：消化系统肿瘤 病理学 鞘磷脂磷酸二酯酶 代谢 @真核表达载体 

分 类 号：R735.2[医药卫生—肿瘤]