P15^(INK4b)对人黑色素瘤细胞周期及G_1期相关调控基因的影响  

作　　者：刘军[1] 童迎凯[1] 柳惠图[1] 张伟[1] 高萍[1] 

机构地区：[1]北京师范大学生命科学学院细胞所

出　　处：《自然科学进展（国家重点实验室通讯）》2000年第12期1099-1103,共5页

基　　金：国家自然科学基金(批准号:39780014);北京市自然科学基金(批准号:7961001);国家重点基础研究项目(批准号:1999053901);高等学校博士学科点专项基金(批准号:98002714)资助项目

摘　　要：人黑色素瘤细胞A375是P15^(INK4b)缺失细胞系,通过细胞转染技术将外源P15^(INK4b)cDNA转染A375细胞,经PCR和Western blot检测,证明构建了P15^(INK4b)稳定表达细胞模型MLIK6。流式细胞光度术结果显示,与对照组MLC2相比,MLIK6细胞G_1期升高11％,S期下降14％。利用TdR-N_2O同步法所得同步的MLIK6和MLC2的M期细胞比例分别达到89.1％和76.8％,而G_1期的比例分别为74.3％和76.4％。~3H-TdR掺入的结果显示,MLIK6从G_1期进入S期的时间比MLC2延长2 h,并且掺入强度明显减弱。进一步探讨P15^(INK4b)对G_1/S相关调控基因的影响,发现G_1期的MLIK6细胞在诱导P27表达升高的同时,cyclinD1,CdK4,cyclinE和c-myc的蛋白水平均降低,其中cyclinD1的抑制在晚G_1期附近最显著,而对cyclinE的抑制则在G_1/S转换处表现突出,癌基因c-myc表达受到明显抑制并贯穿于G_1→S全部时间进程中。说明P15^(INK4b)是通过对G_1期不同阶段细胞周期引擎分子cyclinD1,CdK4,cyclinE和癌基因c-myc的抑制及增加CKI P27延缓了G_1/S进程。

关 键 词：细胞周期 G1期相关基因表达 细胞同步化 人黑色素瘤细胞 调控基因 细胞周期蛋白激酶抑制因子 

分 类 号：R730.21[医药卫生—肿瘤]