miR-34a对神经母细胞瘤细胞生长、侵袭和迁移的影响  

Effect of miR-34a on cell growth, migration and invasion in neuroblastoma

作　　者：潘敏[1] 陈鑫[2] 张虹[2] 韩芦芦[3] 鹿洪亭[2] 郝希伟[2] 董蒨[2] 

机构地区：[1]青岛大学师范学院,266071 [2] 青岛大学医学院附属医院小儿外科 [3] 青岛大学医学院附属医院手术室

出　　处：《中华小儿外科杂志》2014年第5期338-342,共5页Chinese Journal of Pediatric Surgery

基　　金：国家自然科学基金面上项目（81272986）、山东省自然科学基金重点项目（ZR2011HZ002）、山东省高校科技计划（J11LF58）

摘　　要：目的 检测miR-34a在原发性和转移性神经母细胞瘤组织中的表达水平,并探讨miR-34a对神经母细胞瘤细胞生长、侵袭和迁移的影响.方法 收集18例神经母细胞瘤患儿（神经母细胞瘤原发部位以及转移部位）,利用实时定量PCR检测miR-34a在原发性和转移性神经母细胞瘤组织中的表达水平.在神经母细胞瘤细胞中瞬时转染miR-34a mimics,利用平板克隆形成实验、MTT、侵袭实验和体外划痕实验检测miR-34a对细胞生长、侵袭和迁移的影响.最后利用Western印迹检测miR-34a对生长以及侵袭迁移相关蛋白表达水平的影响.结果 与原发性神经母细胞瘤组织相比,miR-34a在转移性神经母细胞瘤组织中表达降低.与对照细胞组相比,转染miR-34a mimics的细胞克隆数目降低（SH-SY5Y：24＆#177;3.07比43＆#177;6.29和IMR-32：17＆#177;2.36比37＆#177;5.41）,细胞活性下降,并且细胞侵袭和迁移能力也降低（差异具有统计学意义）.Western结果显示miR-34a抑制CD44、CDK4、CCND1和CCNE2的蛋白水平.结论 miR-34a分别通过降低CD44、CDK4、CCND1和CCNE2的表达水平,而抑制神经母细胞瘤细胞的生长、侵袭和迁移,发挥着肿瘤抑癌基因的作用,提示miR-34a可能作为神经母细胞瘤分子治疗的靶点.Objective To determine the expression levels of miR-34a in primary and metastatic neuroblastoma tissues and the effects of miR-34a in neuroblastoma cell growth,migration and inva sion.Methods Quantitative real-time polymerase chain reaction （Q-PCR） was performed to analyze the miR-34a expression levels in primary and metastatic neuroblastoma tissues.The cells were transfected with miR-34a mimics and controls using LipofectamineTM 2000.Then the cell growth,invasion and migration abilities were examined with colony formation,methylthiazoletetrazolium （MTT）,Transwell invasion and wound healing assays.Finally the effects of miR-34a on CD44,CDK4,CCND1,CCNE2 and MYCN were measured by Western blot.Results miR-34a was down-regulated in metastatic neuroblastoma tissues.The cells with miR-34a mimics had a lower cell colony number （SHSY5Y：24 ＆#177; 3.07 vs 43 ＆#177; 6.29 ＆amp; IMR-32：17-＆#177; 2.36 vs 37 ＆#177; 5.41） and reduced cell viability,invasion and migration abilities （P〈0.05）.miR-34a inhibited the expressions of CD44,CDK4,CCND1 and CCNE2 proteins.Conclusions miR-34a suppresses the growth,migration and invasion of neuroblastoma cell through the inhibited expressions of CD44,CDK4,CCND1 and CCNE2.Thus it may serve as a potential molecular therapeutic target for neuroblastoma.

关 键 词：神经母细胞瘤 肿瘤转移 

分 类 号：R739.4[医药卫生—肿瘤]