复制缺陷型腺病毒AdE1CMV-NGF的制备  

The Preparation of Replication-deficient Recombinant Adenovirus AdE1CMV-NGF

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作  者:刘世全[1] 张薇[2] 贾东辉[3] 王申五[1] 郑姝颖[1] 王薇[4] 张惠蓉[4] 

机构地区:[1]北京医科大学人民医院中心实验室 [2]北京友谊医院眼科 [3]中国医科院肿瘤医院 [4]北医大三院眼科

出  处:《首都医科大学学报》2001年第1期24-26,共3页Journal of Capital Medical University

基  金:北京市自然科学基金!资助项目 (7972 0 18)

摘  要:通过DNA重组技术 ,经亚克隆和克隆过程构建分泌表达型重组腺病毒穿梭质粒pAdE1CMV NGF ;制备完整高纯度辅助病毒 pJM1 7。将 pAdE1CMV NGF和 pJM1 7在 2 93细胞中同源重组 ,获得复制缺陷型腺病毒重组体AdE1CMV NGF。梯度系列稀释测得滴度为 4 .6× 1 0 10 PFU/mL。With the DNA recombinant techniques, we constructed a secretable form of adenoviral shuttle plasmid pAdE1CMV NGF through sub cloning and cloning steps. And then pAdE1CMV NGF was cotransfected with pJM17 in 293 cells with the application of FuGENE 6 to produce the replication deficient virions containing the cDNA of interest, AdE1CMV NGF. The titer reached 4.6×10 10 PFU/mL by grade dilution evaluation.

关 键 词:NGF基因 腺病毒载体 基因转移 同源重组 基因治疗 AdE1CMV-NGF 

分 类 号:Q78[生物学—分子生物学] R394[医药卫生—医学遗传学]

 

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