柱前衍生RP-HPLC法测定黄芩中氨基酸含量  

Content determination of amino acid in Radix Scutellariae by precolumn derivatization RP-HPLC

作　　者：马爽[1] 赵岩[1] 赵晓红 陆珞 蔡恩博[1] 张连学[1] 

机构地区：[1]吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118 [2]吉林省食品药品审评中心,吉林长春130062

出　　处：《上海中医药杂志》2014年第5期113-116,共4页Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine

基　　金：国家科技部科技支撑计划项目(2011BAI03B01);国家农业部公益性行业(农业)科研专项(201303111);吉林省科技发展计划项(20126046;20140204013YY);吉林省中医药产业发展专项(YYZX201258);国家自然科学基金项目(31000154)

摘　　要：目的采用柱前衍生RP—HPLC法对黄芩中游离及总氨基酸进行测定。方法以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂；色谱柱为Ultimate Amino Acid氨基酸分析专用柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相：A为乙腈-水（80：20，WV），B为三水合醋酸钠缓冲溶液（pH6．5）-乙腈（93：7，V／V），梯度洗脱；检测波长为254nm。结果21种氨基酸在0．0025～2．5000mmol／L内呈良好的线性关系（R^2〉0．9990）。21种游离氨基酸平均回收率在93．72％～105．03％之间，RSD在0．81％～3．15％之间（n=6）；总氨基酸平均回收率在95．22％～102．04％之间，RSD在0．47％～2．44％之间（n=6）。结论柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确，具有良好的重复性和稳定性，适合黄芩中氨基酸含量测定。Objective To determine the content amino acid in Radix ScuteUariae by pre-column derivatization RP-HPLC. Methods The samples were derived with phenylisothiocyanate （PITC）. The column was Ultimate Amino Acid of specific column （4.6 mm × 250 mm, 5μm） ; Mobile phase： A is mixture of acetonitrile-water （ 80 ： 20, V/V） , B is a buffer solution of sodium acetate trihydrate （ pH 6.5 ） -acetonitrile （93 ： 7, V/V） , eluting with a gradient. UV wavelength was set at 254 nm. Results The linear range of 21 amino acids was 0. 002 5 - 2. 500 0 mmol/L （ R2 〉 0. 999 0） ; the average recovery rates of 21 free amino were ranged from 93.72% to 105.03% （ RSD = 0.81% - 3.15%, n = 6）, the average recovery of rates of 21 total amino acids was ranged from 95.22% to 102.04% （RSD =0.47% -2.44%, n = 6 ）. Conclusion This method is flexible, accurate and repeatable and stable for the determination of amino acids in Radix Scutellariae.

关 键 词：黄芩 柱前衍生 氨基酸 高效液相色谱 

分 类 号：R284.1[医药卫生—中药学]