[α-^(32)P]dCTP的制备  

THE PREPARATION OF [α-^(32) P]dCTP

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作  者:沈德恒[1] 王美中[1] 

机构地区:[1]中国原子能科学研究院

出  处:《核化学与放射化学》1991年第1期44-48,共5页Journal of Nuclear and Radiochemistry

摘  要:^(32)P标记核苷酸是遗传工程研究中的一个重要工具。[α-^(32)P]dCTP在^(32)P标记的核苷酸中占有重要地位。由于它在某些生物组织的DNA中有较高的克分子比,因而使研究方法上的灵敏度更高,更为使用者所欢迎。[α-^(32)P]dCTP既可直接用于DNA序列分析上的研究,又可掺入到各种DNA中制备成探针,进行分子杂交,广泛地用于难重病症(如癌症)的研究,疾病(如爱滋病、乙肝)的诊断,疑案(如谋杀、强奸案)的鉴定等。随着科技的发展。Two modifications for Johnson's enzymatic method of preparation of [α-32P]dCTP are introduced as follows, (1) temperature of reaction in the second stage is controlled at 5-22℃; (2) nuclease P1 is eliminated from the procedure in the third stage. Owing to reduced temperature the final yield of the procedure reaches 90-97% relative to 32Pi. The product cost is reduced and the operating process is simplified as a result of eliminating nuclease P1.

关 键 词:核苷酸 标记 磷32 酶法 

分 类 号:Q78[生物学—分子生物学]

 

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