重组人巨细胞病毒gp52蛋白的纯化及鉴定  

Purification and Identification of Recombinant HCMV gp52 Protein

作　　者：陶开华[1] 李越希[1] 汪兴太[2] 李长贵[2] 郁兴明[1] 黄培堂[3] 

机构地区：[1]南京军区军事医学研究所,南京210002 [2]中国药品生物制品检定所,北京100050 [3]军事医学科学院生物工程研究所,北京100071

出　　处：《中国生物制品学杂志》2001年第2期75-77,共3页Chinese Journal of Biologicals

摘　　要：目的 对大肠杆菌表达的人巨细胞病毒ｇｐ５２蛋白纯化及鉴定。方法 将表达ｇｐ５２蛋白的菌体超 声裂解后，离心取上清，经ＤＥＡＬＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ阴离子柱纯化，收集纯化的ｇｐ５２蛋白，再上Ｓ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ　ＦＦ阳离子柱纯 化，收集纯化的ｇｐ５２蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测其纯度，用Ｗｅｓｔｅｍ　ｂｌｏｔ和 ＥＩＬＳＡ检测其抗原性。结果 纯化的ｇｐ５２蛋 白纯度达８５％以上，并有较好的抗原性和特异性。结论 制备的重组ｇｐ５２蛋白可用于人巨细胞病毒抗体的检测 等研究。Objective To purify and identify the recombinant HCMV gp52 protein expressed in E. coli BL21 (DE3) Methods The recombinant strain expressing gp52 protein was lyzed by ultrasonic wave and harvested by centrifugation. Then the supernatant was pruified by DEAE-Sepharose FF and Sepharose if column chromatography. The purity of purified gp52 protein was detected by SDS-PAGE, and the antigenicity of it by Western blot and ELISA.Results The purified gp52 protein reached a purity of above 95% and showed good antigenicity and specificity. Conclusion The purified gp52 protein is suitable for the detection of anti HCMV IgM.

关 键 词：人巨细胞病毒 gp52蛋白 纯度 抗原性 

分 类 号：R373[医药卫生—病原生物学]