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机构地区:[1]南华大学附二院,湖南衡阳421001 [2]杭州市第一医院,浙江杭州310006 [3]南华大学心血管病研究所,湖南衡阳421001
出 处:《白血病.淋巴瘤》2002年第1期6-9,共4页Journal of Leukemia & Lymphoma
摘 要:目的 :探讨三磷酸腺苷 (ATP)诱导 U93 7细胞凋亡过程中 p73 m RNA的表达变化 ,以进一步研究 p73基因在 U93 7细胞凋亡中的作用。方法 :用 ATP诱导 U93 7细胞凋亡 ,凋亡指标采用细胞形态学、DNA片段电泳、流式细胞术检测 DNA含量及细胞周期的变化等方法 ;采用半定量反转录 PCR(RT-PCR)检测 p73 m RNA的表达变化。结果 :ATP可诱导 U93 7细胞凋亡。 0 .2 5 g/L的ATP作用于 U93 7细胞 2 4h,光镜下见细胞出现较明显的聚集现象 ,胞膜皱缩 ,细胞体积缩小 ,Wright' s+ Giemsa染色见胞核浓缩、核碎裂等现象 ,DNA片断电泳见清晰的梯形条带 ;流式细胞仪检测 :0 .2 5 g/L ATP作用于 U93 7细胞 2 4h、3 6h、48h,细胞的凋亡率分别为 2 .3 3 %、11.90 %、3 5 .49% ,并使细胞阻滞在 G2 ~ M+ S期 ,而对照组细胞凋亡率仅为 1.0 9% ;半定量 RT-PCR结果 :与对照组相比 ,仅 48h组 p73 m RNA的表达下调。结论 :ATP可诱导 U93 7细胞凋亡。在 U93 7细胞凋亡早期 ,p73 mObjective:To study the variation of p73 gene expression in the process of acute myeloid leukemia(AML) cell line U937 apoptosis induced by adenosine triphosphate (ATP).Methods:Wright's+Giemsa staining.DNA Ladder and cell cycle were examined by DNA gel electronphores and fluotescence flow cytometry(FCM),respectively.Using semi quantitive reverse transcription polymease chain reaction(RT PCR) to examine the expression of p73 mRNA.Results:ATP can induce U937 cell apoptosis effectively.Condense of nuclear, fragmentations of chomosome and DNA Ladder were seen after 24h following treatment of 0.25 g/L ATP.Sub G 1 Peak and S+G 2 M arrest were also determined by FCM,but the quantity of p73 expression seems stable.Except ater 48h following treatment of 0.25 g/L ATP.Conclusion:p73 mRNA lever was not changed in U937 cell's early apoptosis induced by ATP.
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