伪狂犬病病毒闽A株gE主要抗原表位基因在大肠杆菌中的克隆与表达  

Cloning and Expression of Pseudorabies Virus Ma Strain′s gE Main Epitopes in E.coli

作　　者：黄毓茂[1] 黄培堂[2] 费恩阁[3] 

机构地区：[1]华南农业大学动物医学系,广东广州510642 [2]军事医学科学院生物工程所,北京100071 [3]解放军军需大学动物科技系,吉林长春130062

出　　处：《中国兽医学报》2002年第2期146-148,共3页Chinese Journal of Veterinary Science

基　　金：广东省自然科学基金资助项目 ( 940 35 2)

摘　　要：根据伪狂犬病病毒 Rise毒株 g E基因序列 ,设计合成 1对引物 ,采用 PCR方法 ,从伪狂犬病病毒闽 A株 DNA扩增出 5 5 8bp片段。将该片段克隆到 p UC19质粒中 ,测序正确后再将其克隆到表达质粒 p ET- 2 8a中 ,以 BL 2 1(DE3)为宿主菌 ,在 IPTG诱导下获得了高效表达。经 SDS- PAGE及 Western- blotting鉴定分析 ,表达蛋白大小约 2 30 0 0 ,蛋白薄层扫描分析表明 ,该蛋白约占菌体总蛋白的 30 %。A 558 bp fragment encoding gE main epitopes of PRV Ma strain was obtained by PCR.This fragment was inserted into cloning vector pUC19 and sequenced,then,the correct gE sequence was introduced into expression vector pET-28a,controlled by T7 promotor.At last,the recombinant plasmid was transformed into E.coli BL21(DE3) and induced with IPTG to express encoded proteins.By analysis of SDS-PAGE and Western-blotting,an expression gE peptide about 23 000 was confirmed and made up of 30% of the total bacteria proteins.

关 键 词：伪狂犬病病毒闽A株 GE基因 大肠杆菌 基因表达 抗原 克隆 

分 类 号：S852.655[农业科学—基础兽医学]