人和鼠脑cDNA文库的建立以及全长cDNA的批量分离  

作　　者：周严[1] 胡松年[1] 黄晓玮[1] 周海军[1] 谈昕煜[1] 刘瑾[1] 强华[1] 彭小忠[1] 强伯勤[1] 袁建刚[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所,医学分子生物学国家重点实验室,北京100005

出　　处：《自然科学进展》2002年第4期377-380,共4页

基　　金：国家重点基础研究发展规划项目(G19988051000);国家自然科学基金(批准号:39830070)资助

摘　　要：应用λZAP Express cDNA文库构建试剂盒构建了人3个月和8个月胎儿脑及大小鼠脑cD-NA文库.第2链cDNA经Sepharose CL-4B凝胶过滤层析后去除了较小的片段,使大片段cDNA具有较高的克隆效率.所建立的文库具有较长的插入片段.合并不同长度范围的人3个月胎儿脑cDNA片段,分别克隆入文库载体,获得了长片段、中片段、短片段及合并cDNA文库.从分级文库中各随机挑取300个克隆,经载体引物PCR扩增后,测定5’末端序列,一共获得894个表达序列标签(EST)序列.根据同源性比较结果将感兴趣的克隆环化后测定全长cDNA序列,得到了12条新的全长cDNA.这些文库的建立以及新EST,cDNA的分离为文库筛选和获得脑表达的新基因奠定了基础.

关 键 词：人 鼠 脑 CDNA文库 批量分离 EST 人类基因组计划 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]