PMA对人肝癌细胞中Ha-ras基因启动子活性的影响及与PKC活性的相关性  

作　　者：柳惠图[1] 冯怡[1] 李娜[1] 庞宇[1] 高萍[1] 

机构地区：[1]北京师范大学生命科学学院细胞增殖与调控生物学教育部重点实验室,北京100875

出　　处：《自然科学进展》2002年第7期754-758,共5页

基　　金：国家自然科学基金(批准号:39870366)

摘　　要：为探讨佛波脂PMA的生物作用与癌基因ras表达及与PKC信号通路的相关性,用人肝癌细胞BEL-7402为模型,以荧光素酶为报告基因观察了PMA对Ha-ras启动子活性的影响.当用100μg/L PMA长期处理人肝癌细胞BEL-7402时,可明显抑制肿瘤细胞生长,通过RT-PCR和Western Blot分析发现,PMA处理后的BEL-7402细胞中Ha-ras mRNA和蛋白水平均明显下降,进一步观察了PMA对Ha-ras基因启动子活性的影响。通过构建含有Ha-ras启动子序列的、以荧光素酶为报告基因的pGL3-ras真核表达载体,利用脂质体瞬时转染技术将其转入BEL-7402细胞中,并通过荧光素酶活性的检测,发现PMA作用48和72h后的BEL-7402细胞中,Ha-ras启动子活性分别被抑制了55％和54％,同时PKC活性分别下降了76.7％和75.7％。并进一步观察到PKCα和βⅠ蛋白水平明显降低。实验结果表明,PMA长期处理的人肝癌细胞可通过抑制Ha-ras启动子的活性使Ha-ras基因表达被抑制,并且可能与PKC信号通路有关。

关 键 词：PMA 人肝癌细胞 Ha-ras基因启动子 PKC活性 佛波脂 蛋白激酶 基因表达 肿瘤促进剂 

分 类 号：R735.7[医药卫生—肿瘤] R730.21[医药卫生—临床医学]