IL-1β诱导的miR-425表达上调对胃癌细胞生长的影响  

MiR-425 up-regulation induced by interleukin-1β promotes the proliferation of gastric cancer cell AGS

作　　者：刘军[1] 厉天瑜 张宁[3] 杨晓群[3] 王志明[2] 马骏[1] 顾喜喜[1] 范越[1] 蔡定芳[1] 

机构地区：[1]复旦大学附属中山医院中西医结合科,上海200032 [2]复旦大学附属肿瘤医院病理科 [3]复旦大学附属中山医院肿瘤内科,上海200032

出　　处：《中华医学杂志》2014年第24期1889-1893,共5页National Medical Journal of China

基　　金：基金项目：国家自然科学基金（81201897）;复旦大学中央高校自主科研项目（20520133503）

摘　　要：目的 探讨白细胞介素1β（IL-1β）促进胃癌细胞生长的机制.方法 采用芯片筛选IL-1β处理后人胃癌细胞系（AGS）细胞中差异表达的miRNAs;应用生物信息学手段及双荧光素酶报告系统筛选并验证miR-425的靶基因;CCK-8检测细胞增殖率;流式细胞仪检测细胞的凋亡;实时聚合酶链反应（Real-time PCR）检测临床样本及细胞中miR-425的表达.结果 （1）IL-1β处理AGS细胞后,29个miRNAs表达上调,17个miRNAs表达下调.其中miR-425在IL-1β处理后表达上调最明显.Real-time PCR结果显示,相比癌旁组织,miR-425在胃癌组织中表达显著上调（均值1.41与5.81,P＜0.000 1）;（2）使用生物信息学方法miRecords预测miR-425的潜在靶基因,经双荧光素酶报告检测,证实PTEN是miR-425的直接靶标;（3）使用核因子（NF）-κB单克隆抗体对AGS细胞行染色质免疫沉淀,证实NF-κB蛋白与miR-425的启动子中形成了复合物.荧光素酶报告基因的结果显示：miR-425启动子上B结合位点是IL-1β诱导miR-425转录激活必需的;（4）IL-1β诱导的miR-425表达上调促进细胞的增殖,抑制细胞凋亡.结论 IL-1β通过激活NF-κB诱导miR-425表达上调,负性调控PTEN进而促进胃癌细胞的增殖和抗凋亡作用.Objective To evaluate the mechanism of interleukin-1 （IL-1） in tumorigenesis.Methods The miRNA expression was profiled with the Exiqon miRCURYTM LNA Array System.And the miRecords algorithm and luciferase reporter assays were employed for identifying the targets of miR-425.Cell proliferation assay was performed with CCK8.Cell apoptosis assay was performed with flow cytometry.Results IL-1 β induced the up-regulation of miR-425,a negative expression regulator of phosphatase and tensin homolog （PTEN）.An increase in miR-425 depended upon IL-1 β-induced NF-kappaB activation.Repression of PTEN by miR-425 promoted gastric cancer cell proliferation.Conclusion There is a critical role for NF-kappa B-dependent up-regulation of miR-425.And it represents a new pathway for the repression of phosphatase and tensin homolog activation and the promotion of cell survival upon IL-1 β induction.

关 键 词：胃肿瘤 白细胞介素1Β 核因子-ΚB 微RNAS 

分 类 号：R735.2[医药卫生—肿瘤]