醋酸棉酚对人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1基因甲基化和mRNA表达的影响  

The effects of gossypol acetic acid on DNA methylation level and the mRNA expression of hMLH1 gene in human tongue carcinoma Tca8113 cells

作　　者：陈文飞[1] 付帅[1] 岳万远[1] 吴勇[1] 

机构地区：[1]昆明医科大学附属口腔医院口腔颌面外科,650031

出　　处：《实用口腔医学杂志》2014年第4期551-555,共5页Journal of Practical Stomatology

基　　金：国家自然科学基金(编号:81160326);云南省科技计划项目(编号:2009CD207)

摘　　要：目的:研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1基因甲基化及mRNA表达的影响。方法:应用MTT法检测GAA对人舌癌Tca8113细胞增殖的作用。应用巢式甲基化特异性PCR(nMSP)检测Tca8113细胞在GAA作用48、72 h后hMLH1甲基化状态的改变情况。应用实时荧光定量法(RFQ-PCR)检测Tca8113细胞在GAA作用72 h后hMLH1 mRNA的表达变化。结果:GAA作用Tca8113细胞24、48和72 h后,细胞增殖受到抑制。30、15μmol/L的GAA作用Tca8113细胞48、72 h后,hMLH1甲基化条带的平均光度低于对照组(P<0.05)。5、10、15和20μmol/L GAA作用Tca8113细胞72 h后,细胞中hMLH1 mRNA的表达水平高于对照组(P<0.05)。结论:GAA能抑制Tca8113细胞增殖,能降低hMLH1基因的甲基化水平,增强hMLH1基因mRNA表达,这可能是GAA抗肿瘤作用的机制之一。Objective：To study the effects of gossypol acetic acid（GAA）on the methylation level and the mRNA expression of hM-LH1 in human tongue cancer Tca8113 cells.Methods：Tca8113 cells were treated by GAA at various doses for 24 h,48 h and 72 h respectively.MTT assay was used to detect the cell proliferation.Nested methylation specific PCR（nMSP）was used to detect methylation level of hMLH1 .Real-time fluorescence quantitative PCR（RFQ-PCR）was applied to investigate the mRNA expression of hM-LH1 gene.Results：GAA inhibited the proliferation of Tca8113 cells dose-and-time dependently,decreased the DNA methylation level of hMLH1（P〈0.05）and increased hMLH1 mRNA expression in Tca8113 cells（P〈0.05）.Conclusion：GAA can suppress proliferation of Tca8113 cells by demethylation of hMLH1 gene and increase of hMLH1 mRNA expression.

关 键 词：人舌鳞癌 棉酚 抑癌基因 DNA甲基化 

分 类 号：R739.8[医药卫生—肿瘤]