利用超分支滚环扩增技术检测miR-21  

作　　者：郭仲莉[1,2] 曾照芳[2] 鲁卫平[1] 

机构地区：[1]第三军医大学大坪医院野战外科研究所检验科,重庆400042 [2]重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016

出　　处：《第三军医大学学报》2014年第18期1963-1965,共3页Journal of Third Military Medical University

基　　金：国家自然科学基金(81171667);重庆市科委攻关课题(CSTC2011AC5033)

摘　　要：目的利用超分支滚环扩增(hyper-rolling cycle amplification,HRCA)技术建立一种检测microRNA的方法。方法以miR-21为研究对象,设计特异的逆转录引物及锁式探针。通过对不同浓度的模板及不同的microRNA进行检测来研究本方法的灵敏度和特异性。结果通过对反应条件进行优化,100 nmol/L的锁式探针在Taq DNA连接酶作用下46℃连接30 min,Bst DNA聚合酶作用下60℃反应50 min,可实现靶序列最大效率的扩增。该方法特异性好,最低检测浓度为10 pmol/L。结论 HRCA技术灵敏度高、特异性好,无需特殊昂贵的仪器,且简单易操作,能够应用于microRNA检测。

关 键 词：MIR-21 超分支滚环扩增技术 锁式探针 

分 类 号：R394-33[医药卫生—医学遗传学]