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作 者:王帆[1] 周戬平[2] 谢小娟[3] 胡军[4] 郭华[4] 胡巧侠[4]
机构地区:[1]陕西省人民医院妇科,陕西西安710068 [2]西安交通大学医学院第二附属医院小儿科,陕西西安710054 [3]陕西省人民医院临床检验中心,陕西西安710068 [4]陕西省人民医院中心实验室,陕西西安710068
出 处:《现代肿瘤医学》2015年第1期1-4,共4页Journal of Modern Oncology
基 金:国家自然科学基金资助项目(编号:30901600);陕西省自然科学青年人才项目(编号:2013JQ4003)
摘 要:目的:探讨长链非编码RNA UCA1对卵巢癌细胞SKOV3侵袭及迁移能力的影响及可能的作用机制。方法:用脂质体2000将pc DNA/UCA1表达载体及pc DNA3.1空载体转染卵巢癌细胞SKOV3细胞。用G418筛选,建立稳定表达UCA1 RNA的SKOV3/pc DNA-UCA1细胞及转染空载体的SKOV3/pc DNA3.1细胞。RT-PCR方法检测两株细胞中UCA1的表达,鉴定阳性细胞株。Millicell小室检测两株细胞侵袭及迁移能力的变化,蛋白印迹法检测两株细胞MMP2及MMP9蛋白表达的变化。结果:成功构建稳定表达UCA1的SKOV3细胞,表达UCA1 RNA后,SKOV3细胞的侵袭及迁移能力均增加,MMP2及MMP9蛋白表达增加。结论:UCA1 RNA可能通过增加SKOV3细胞中MMP2及MMP9的表达来增强其侵袭及迁移能力,在卵巢癌侵袭及进展中发挥作用。Objective:To study the invasion and migration ability of long chain non-coding RNA UCA1 in ovari-an cancer cells SKOV3. Methods:Constructing eukaryotic expression vector pcDNA/UCA1. pcDNA/UCA1 construct was transfected into SKOV3 cells by lipofectamine2000 for 24h and selected with 500μg/ml G418 for 3 weeks,trans-fected with pcDNA3. 1 empty vector acted as a control. The positive clone was identified by reverse transcription poly-merase chain reaction( RT -PCR ) for UCA 1 RNA expression . Cell invasion and migration ability was assessed by using millicell chamber. MMP2 and MMP9 protein level was detected by Western blotting analysis. Results:We successfully established the SKOV3 cell stable expressing pcDNA/UCA1 transfectant. Exogenous expression of UCA1 in SKOV3 cells enhanced migration and invasion ability of cells. Conclusion:MMP2 and MMP9 protein expression in-creased in SKOV3/pcDNA-UCA1 cells compared with SKOV3/pcDNA3. 1 cells. Which suggested that UCA1 RNA might play some role in SKOV3 cells invasion and progression.
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