稳定表达乙型肝炎病毒X和MicroRNA-21基因肝细胞株的构建方法研究  

作　　者：舒涛[1] 丁彦[2] 肖丽霞[3] 谢斌辉[4] 

机构地区：[1]赣南医学院第一附属医院消化科,江西省赣州市341000 [2]赣南医学院第一附属医院呼吸科,江西省赣州市341000 [3]赣南医学院第一附属医院内分泌科,江西省赣州市341000 [4]赣南医学院第一附属医院普外科,江西省赣州市341000

出　　处：《实用心脑肺血管病杂志》2014年第10期26-27,共2页Practical Journal of Cardiac Cerebral Pneumal and Vascular Disease

基　　金：赣州市指导性科技计划;江西省自然科学基金(2012ZBA205001);江西省科技厅支撑计划项目(20112BBG70037)

摘　　要：目的探讨稳定表达乙型肝炎病毒X(HBVX)和MicroRNA-21基因肝细胞株的构建方法。方法应用LE培养基对大鼠肝细胞株进行培养,将pcDNA 3.1-HBVX质粒中的HBVX序列作为实验模板,采用PCR法对获得的目的基因HBVX片段进行扩增,构建稳定表达的HBVX和MicroRNA-21基因肝细胞株。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后观察HBVX基因克隆结果,鉴定pcDNA 3.1(+)/HBVX重组质粒和MicroRNA-21质粒。结果 PCR产物HBVX基因片段中存在全部HBVX基因编码序列;RT-PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后可见长度为300 bp的MicroRNA-21前体片段。结论本研究成功构建了稳定表达HBVX和MicroRNA-21基因肝细胞株,为临床进行深入研究提供了实验基础。

关 键 词：病毒 乙型肝炎 微RNAS MicroRNA-21基因 肝细胞株 

分 类 号：R735.7[医药卫生—肿瘤]