百蕊草根系总RNA提取方法比较及优化  

作　　者：刘波[1] 张晓明[1] 郭巧生[1] 王长林[1] 

机构地区：[1]南京农业大学中药材研究所,江苏南京210095

出　　处：《江苏农业科学》2015年第1期44-46,共3页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金(编号:81202867)

摘　　要：百蕊草根系富含多糖、多酚和其他次生代谢产物,用传统方法提取总RNA难以有效将这些杂质去除。以百蕊草根系为材料,比较TRIzol法、CTAB-Li Cl法、SDS/酚法及改进TRIzol法4种方法对百蕊草根系总RNA的提取效果,并以电泳检测、D260 nm/D280 nm比值测定、RT-PCR试验等对结果进行分析评价。结果表明,4种方法均能提取百蕊草根中总RNA,提取效果差异显著;改进TRIzol法提取总RNA的28S和18S条带清晰,无弥散,28S亮度比18S加倍,完整性好,无明显DNA或其他杂质污染,D260 nm/D280 nm值为1.8-2.0,D260 nm/D230 nm值大于2.0,总RNA得率仅次于TRIzol法;用改进TRIzol法提取总RNA,反转录c DNA片段大小分布在0.2-2.5 kb,可扩增出目的基因片段,提取的总RNA完全适用于后续的分子生物学研究。

关 键 词：百蕊草 总RNA提取 多糖 多酚 TRIZOL法 RT-PCR 

分 类 号：Q522[生物学—生物化学]