Hedgehog信号通路在人角膜缘微环境来源的基质干细胞中表达情况的研究(英文)  

Hedgehog signaling pathway in the mesenchymal stem cells derived from human limbal niche

作　　者：王娟[1] 李贵刚[1] 李飞[2] 蔡苏博 魏睿[2] 李新宇[1] 

机构地区：[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科,中国湖北省武汉市430030 [2]华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,中国湖北省武汉市430030

出　　处：《国际眼科杂志》2015年第4期567-571,共5页International Eye Science

基　　金：National Natural Science Foundation of China(No.81200661);Natural Science Foundation of Hubei Province(No.2013CFB084)~~

摘　　要：目的:探讨Hedgehog信号通路在人角膜缘微环境来源的基质干细胞(LNC)中的表达情况。方法:对贴壁生长的人角膜缘来源的基质干细胞(LNC)进行分离培养及传代,对骨髓间充质干细胞系(BMMSC)进行培养传代。通过将BMMSC作为阳性对照,采用Western blot技术,免疫荧光技术,real-time PCR技术从蛋白水平及基因水平验证Hedgehog信号通路成员SHH,patched,SMO,Gli-1在LNC中的表达情况。最后采用Cell Count Kit-8检测不同浓度Gli抑制剂GANT61(空白,1,5,10,15,20,25,30μmol/L)处理LNC和BMMSC48h后的增殖抑制效应反向验证Hedgehog信号通路在LNC中的存在。结果:Western blot技术,免疫荧光技术,real-time PCR技术均证明LNC细胞表达Hedgehog信号通路中的Gli-1,patched,SMO,且Gli蛋白抑制剂GANT61可以显著抑制LNC细胞增殖(P<0.05)。结论:Hedgehog信号通路在LNC细胞的增殖过程中发挥重要作用。AIM： To investigate the expression of Hedgehog signaling pathway in the mesenchymal stem cells derived from human limbal niche（ LNCs）.METHODS： Culture and passage the mesenchymal stem cells derived from LNCs and bone marrow-derived mesenchymal stem cells（ BMMSCs） in vitro. Using BMMSCs as a positive control, the expression of Hedgehog signaling pathway in LNCs was evaluated by Western blot,immunofluorescence and real- time PCR.Furthermore, different doses（ 1, 5, 10, 15, 20, 25,30μmol /L） of GANT61（ the Gli inhibitor） effect on the proliferation of LNCs and BMMSCs was detected by Cell Count Kit-8.RESULTS： The results of Western blot,immunofluorescence and real- time PCR proved that LNCs expressed Gli-1,patched and SMO,which are the members of Hedgehog signaling. In addition,GANT61（ the Gli inhibitor） inhibited the proliferation of LNCs significantly（ P 〈0. 05）.CONCLUSION： Hedgehog signaling pathway plays an important role in the proliferation of LNCs.

关 键 词：HEDGEHOG信号通路 角膜缘细胞 骨髓间充质干细胞系 

分 类 号：R772.2[医药卫生—眼科]