转导hTERT基因致人牙髓干细胞永生化的研究  

Immortalization of human dental pulp stem cells caused by transferring hTERT gene

作　　者：高丽[1] 王玉霞[1] 江文欣 何智妍[2] 朱彩莲[2] 马瑞[1] 

机构地区：[1]上海交通大学医学院附属第九人民医院.口腔医学院牙体牙髓病科,上海200011 [2]上海市口腔医学重点实验室,上海200011

出　　处：《上海口腔医学》2015年第2期135-140,共6页Shanghai Journal of Stomatology

基　　金：国家自然科学基金(81371143);上海市启明星计划(12QH1401400)~~

摘　　要：目的 :建立永生化人牙髓干细胞系(human dental pulp stem cell,h DPSC),供口腔医学临床和基础研究使用。方法:原代培养人牙髓细胞并筛选牙髓干细胞,以慢病毒为载体,导入端粒酶反转录酶基因(h TERT)全长c DNA,经筛选得到阳性克隆。体外连续传代,应用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和蛋白质印迹技术(Western blot)检测h TERT的整合和表达情况。结果 :成功地将h TERT基因转入人牙髓干细胞,得到的转化细胞端粒酶表达阳性,增殖旺盛,至今已传至第35代。结论:转导外源性h TERT基因可以导致人牙髓干细胞永生化。PURPOSE： To establish an immortalized human dental pulp stem cell line used for basic and clinical research of oral science. METHODS： Human telomerase reverse transeriptase （hTERT） eDNA was transferred into human dental pulp stem cells （hDPSCs） by lentivirus. The resultant stable clones reproduced successively and the expression of hTERT was identified. RESULTS： The hTERT gene was transferred into human dental pulp stem ceils successfully. The transformed cells expressed telomerase activity and divided vigorously, p35 had been obtained so far. CONCLUSIONS： The hDPSCs can be immortalized by transferring exogenous hTERT gene to constitute telomerase activity.

关 键 词：端粒酶反转录酶基因 牙髓干细胞 永生化 

分 类 号：R780.2[医药卫生—口腔医学]