MsiR高可溶性蛋白突变株的筛选  

Screening of mutant strains with high soluble expression of MsiR

作　　者：马腾[1] 赵亚琪[1] 路福平[1] 蔡韬[2] 

机构地区：[1]天津科技大学生物工程学院,天津300222 [2]中国科学院天津工业生物技术研究所,天津300308

出　　处：《中国酿造》2015年第5期43-47,共5页China Brewing

基　　金：天津市科技计划项目(13ZCZDSY05100)

摘　　要：外源蛋白在表达宿主中的可溶性是影响其应用的关键因素。采用m Cherry报告基因,构建Msi R-m Cherry融合蛋白,通过测定荧光值定性定量的测定Msi R蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达量。随后,利用易错聚合酶链反应(Errorprone-PCR)和致突变菌株(XL1-Red)两种方式构建了msi R-m Cherry基因突变文库,经筛选得到了4株在大肠杆菌中以37℃作为诱导温度下可溶性明显提高的蛋白突变体。The soluble expression of heterologous protein in expression host is a key factor affecting their applications, mCherry, a fluorophore reporter gene, was used as a fusion protein to analyze the soluble expression of MsiR protein quantitatively in E. coli. Errorprone PCR and XL1-Red were applied in constructing a msiR-mCherty gene mutant library. Four mutant strains improving the soluble expression of MsiR protein at 37℃ in E. coli were finally obtained.

关 键 词：mCherry报告基因 基因突变文库 筛选 LysR转录调控家族 MsiR 

分 类 号：Q819[生物学—生物工程]