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机构地区:[1]广州医科大学附属第一医院肿瘤血液中心实验室,广州510230 [2]广州军区武汉总医院神经外科,武汉430070
出 处:《广东医学》2015年第13期2004-2006,共3页Guangdong Medical Journal
摘 要:目的探讨miR-329对神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法构建稳定表达人miR-329前体的载体,转染SNB19神经胶质瘤细胞,将实验分为两组,空白组为转染pc DNA6.2-GW/Em GFP空载体的细胞,高表达miR-329组为转染pc DNA6.2-GW/Em GFP/miR-329载体,并建立稳定高表达miR-329的细胞。然后分别采用MTT法、克隆形成实验、Brd U掺入实验及Western blot检测空白组和高表达miR-329组细胞的增殖抑制速率、细胞的增殖能力、细胞的增殖活性及靶基因E2F1在蛋白水平的表达。结果与空白组相比,高表达miR-329组增殖速率减慢,指数增殖特征明显减弱;克隆形成实验显示高表达miR-329组克隆形成明显减少,克隆形成率为(5.5±1.7)%,与空白组的(14.3±2.5)%比较差异有统计学意义(P<0.05)。Brd U掺入实验显示空白组细胞在生长过程Brd U阳性的细胞为(32.4±4.7)%,与高表达miR-329组的Brd U阳性细胞的(18.1±2.3)%比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot显示在SNB19细胞中过表达miR-329后,其靶基因E2F1的表达明显被抑制。结论 miR-329的表达可抑制SNB19神经胶质瘤细胞的增殖,可能发挥类似抑癌基因的作用,其抑制细胞增殖的机制可能与靶向E2F1的作用相关。
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