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作 者:常福厚[1,2,3] 白图雅[1,2,3] 吕晓丽[1,2,3] 余婉佳 胡玉霞
机构地区:[1]内蒙古医科大学药学院药理学教研室 [2]新药安全评价研究中心 [3]内蒙古自治区新药筛选工程研究中心,内蒙古呼和浩特010110
出 处:《中国药理学通报》2015年第B11期1-1,共1页Chinese Pharmacological Bulletin
基 金:国家自然科学基金(No812604999,81160406)
摘 要:目的观察苯并(a)芘(Benzo(a)pyrene,B[a]P)对SD大鼠肺组织内细胞色素P4501A2(cytochromeP4501A2,CYP1A2)和细胞色素P4502E1(cytochromeP4502E1,CYP2E1)基因表达的影响.方法(1)动物及给药方法:40只健康SD大鼠,♀♂各半,清洁级,200~250g,随机分为B[a]P25mg·kg^-1、B[a]P50mg·kg^-1和B[a]P100mg·kg^-1染毒组和空白对照组,每组10只.各染毒组B[a]P溶于橄榄油成均匀的混悬液,空白对照组给等体积的橄榄油,每日1次,连续灌胃14d(染毒各组在d14一次性腹腔注射各个剂量的B[a]P后),禁食不禁水24h后断头放尽血液,剖胸迅速取出肺组织放入液氮中速冻,后迅速转移至-80℃冰箱保存备用(用于总RNA提取和基因表达分析).(2)大鼠肺组织RNA的提取:参照RNA提取试剂盒说明书方法提取大鼠肺总RNA,测定RNA溶液的吸光度(A260)和A260/A280以判断总RNA的浓度和纯度,甲醛变性琼脂糖凝胶电泳以判断RNA的完整性.(3)逆转录聚合酶链反应(RT-PCR):用RT-PCR反应试剂盒检测CYP1A2和CYP2E1基因mRNA的表达,以β-actin作为内对照,分析B[a]P对大鼠肺组织中CYP1A2和CYP2E1基因mRNA表达的影响.结果与空白对照组相比,高、中剂量的B[a]P组可显著影响肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因的表达,差异具有统计学意义(P〈0.05),而低剂量的B[a]P组与空白对照组比较差异无显著性(P〉0.05).结论一定剂量的B[a]P可显著影响肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因的表达,提示CYP1A2和CYP2E1基因可能参与B[a]P的代谢过程,催化B[a]P生成有毒的代谢产物,本研究对B[a]P相关的代谢酶的影响及B[a]P致癌机制的探讨具有-定的理论意义,为进一步探索B[a]P的致癌机理及与代谢酶相关基因的相互作用奠定一定的研究基础.
关 键 词:CYP2E1基因 CYP1A2 基因表达分析 大鼠肺组织 苯并(A)芘 总RNA提取 基因MRNA表达 逆转录聚合酶链反应
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