沉默钙激活氯通道ANO1促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡  

作　　者：宋艳[1] 关立照[1] 王克威[1] 

机构地区：[1]北京大学药学院分子与细胞药理学系,北京100191

出　　处：《中国药理学通报》2015年第B11期9-9,共1页Chinese Pharmacological Bulletin

基　　金：北大医学部方正创新药物研究基金资助项目

摘　　要：目的探讨沉默钙激活氯通道（anoctamin1,ANO1）对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响及其分子机制.方法采用siRNA沉默ANO1在PC-3细胞的表达;采用ELISA、流式细胞仪检测细胞凋亡;采用Apo-ONEHomogeneous Caspase-3/7Assay检测Caspase活性;采用基因表达谱分析检测沉默ANO1表达后PC-3细胞内基因变化,以及Real-timePCR和Westernblot验证.将全长ANO1基因（来源于NCBI）与pIRES2-EGFP融合,构建ANO1-IRES2表达载体,获得稳定表达ANO1的RWPE-1细胞系.结果ANO1在人前列腺癌PC-3细胞中呈高表达,沉默ANO1可诱导PC-3细胞凋亡,并增加肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor,TNF-α）表达和Caspase-3/7活性.TNF-α抑制剂来那度胺（lenalidomide）20nmol·L^-1可逆转沉默ANO1诱导的细胞凋亡.同时,ANO1在人正常前列腺细胞RWPE-1中呈低表达,过表达ANO1可降低RWPE-1细胞凋亡,同时降低TNF-α表达和Caspase-3/7活性.总之,ANO1表达与TNF-α呈负相关.结论沉默ANO1表达可诱导PC-3细胞凋亡,其机制可能与激活TNF-α介导的信号转导通路相关.

关 键 词：钙激活氯通道 ANO1-TMEM16A 前列腺癌 细胞凋亡 肿瘤坏死因子TNF-Α 

分 类 号：R730.1[医药卫生—肿瘤]