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作 者:黄雪琴[1] 崔仲宜 蒋东辉[1] 张月飞[1] 罗国庆[1]
机构地区:[1]广东医学院附属医院耳鼻咽喉科,广东湛江524001 [2]广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江524023
出 处:《广东医学》2016年第2期191-193,共3页Guangdong Medical Journal
基 金:广东省医学科研基金资助课题(编号:B2014297);广东省湛江市科技计划项目(编号:2014B01070)
摘 要:目的从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1中分离外泌体,并对CNE-2所得外泌体进行鉴定。方法使用ExoQuick—TC(SBI)试剂盒法从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1培养上清液分离出外泌体,使用透射电镜观察其形态特征,BCA法进行蛋白定量,Westernblot进行外泌体特异性抗原分子CD63及筏蛋白-1鉴定。结果3种鼻咽癌细胞系培养上清液中均分离出大量泡状物,透射电镜下观察呈圆形的囊泡,直径为40~130nm,具有完整胞膜。且CNE-2来源的此种泡状物表达外泌体特异性膜筏蛋白-l、CD63。10mL对数生长期CNE-2培养上清液得到487μg/mL(以蛋白计)的外泌体200μL。结论本实验室保存的3种鼻咽癌细胞系很可能均能产生外泌体,ExoQtfick—TC(SBI)法能够简便快速地从鼻咽癌细胞系中提取到外泌体,不需要超速离心,为鼻咽癌的防治研究提供了新的研究方法和靶点。
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