重组腺病毒载体Ad5-hOPG-EGFP转染的Beagle犬牙周膜细胞成骨能力研究  

Study of osteogenesis of Beagle dog PDLCs infected by recombinant adenoviral vector Ad5-h OPG-EGFP.

作　　者：唐焜琪[1] 闫福华[2] 

机构地区：[1]福建医科大学附属口腔医院牙周科,福建省高校口腔医学重点实验室,福州350002 [2]南京市口腔医院,南京大学医学院附属口腔医院,南京210008

出　　处：《中国实用口腔科杂志》2015年第12期728-733,共6页Chinese Journal of Practical Stomatology

基　　金：高等学校博士学科点专项科研基金(20093518110002);江苏省双创计划引进人才基金(苏人才办[2014]27号);江苏省"六大人才高峰"高层次人才选拔培养项目基金(2013-SWYY-006);江苏省科技发展计划项目(BL2013002)

摘　　要：目的观察重组腺病毒载体Ad5-h OPG-EGFP转染的Beagle犬牙周膜细胞(PDLCs)体内和体外的骨化能力。方法将体外构建的携带人骨保护素(human osteoprotegerin,h OPG)基因的腺病毒载体Ad5-h OPG-EGFP转染Beagle犬PDLCs,通过体外Von Kossa染色实验、实时荧光定量PCR检测成骨指标的表达情况、酶联免疫检测RANKL/OPG的值及裸鼠体内胶原膜成骨实验比较转染组和对照组的成骨能力。结果组织学和形态学结果显示,转染了重组腺病毒Ad5-h OPG-EGFP的Beagle犬PDLCs形成的矿化结节数目多且体积大、深染。转染组中犬碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)基因相对表达水平均高于空载体组和空白对照组(P<0.05)。转染组中犬RANKL/OPG的值下降趋势最为明显。裸鼠体内实验中转染组胶原膜也体现出较好的成骨能力。结论重组腺病毒介导的h OPG基因可以促进PDLCs成骨。Objective To observe the osteogenesis of periodontal ligament cells （PDLCs） with human osteoprotegerin （hOPG） transfection in vivo and vitro. Methods Ad5-hOPG-EGFP was constructed in vitro and transfected into canine PDLCs. Von Kossa staining, Real-Time PCR, ELISA and experiment in nude mice vivo were used to assess the os- teogenic indices of hOPG-hPDLCs. Results Morphologic and histological study demonstrated that hOPG-hPDLCs formed much more and larger mineralized nodules, and expressed higher level of alkaline phosphates（ALP） ,osteocalcin （OC） and bone sialoprotein （BSP） （P 〈 0.05 ）. RANKL/OPG ratio declined most in hOPG-PDLCs. Transfected collagen membrane group also reflected the better osteogenic ability in nude mice vivo experiment. Conclusion OPG gene transfection can promote osteogenic ability of PDLCs.

关 键 词：牙周膜细胞 骨保护素 成骨能力 

分 类 号：R78[医药卫生—口腔医学]