下调盘状结构域受体1(DDR1)基因抑制4T-1小鼠乳腺癌细胞的迁移  

作　　者：杨婷[1] 张翔[1] 张晓[1] 杨安钢[1] 张瑞[1] 

机构地区：[1]第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,陕西西安710032

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2016年第2期217-220,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金(81572763;81502670)

摘　　要：目的通过短发夹RNA(shRNA)下调小鼠盘状结构域受体1(DDR1)基因的表达,并观察DDR1下调后对4T-1小鼠乳腺癌细胞迁移的影响。方法针对鼠的DDR1基因设计并合成2对shRNA干涉序列连入p LKO.1慢病毒表达载体中。测序正确后利用慢病毒包装系统包装表达shRNA的重组病毒,用获得的病毒感染4T-1细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选并建立稳定细胞系。采用实时定量PCR和Western blot法确定DDR1基因的下调效果。利用TranswellTM小室迁移实验观察DDR1下调后的4T-1细胞迁移能力的变化。结果经测序鉴定后,成功构建了慢病毒p LKO-sh DDR1-1、p LKO-sh DDR1-2以及阴性对照慢病毒p LKO-sh NT。用重组病毒感染4T-1细胞,建立稳定细胞系,实时定量PCR和Western blot法结果表明DDR1基因的明显下调。TranswellTM小室实验显示,与感染p LKO-sh NT的对照细胞相比,感染p LKO-sh DDR1-1和p LKO-sh DDR1-2的细胞迁移能力明显降低。结论下调DDR1基因的表达可以抑制4T-1乳腺癌细胞的迁移。

关 键 词：盘状结构域受体1(discoidin DOMAIN RECEPTOR 1) 慢病毒载体 迁移 4T-1细胞 

分 类 号：R392-33[医药卫生—免疫学] R737.9[医药卫生—基础医学]