二甲双胍对人类表皮生长因子受体-2阳性乳腺癌干细胞自我更新能力的干预  

The research of mefformin effect on the ability of serf - renewal of human epidermal growth factor receptor positive breast cancer stem cells

作　　者：陈天文[1,2] 玉素甫·买买提 刘泽明[1] 何文山[1] 黄韬[1] 

机构地区：[1]华中科技大学同济医学院附属协和医院乳甲中心,武汉430022 [2]广东医学院附属南山医院甲乳外科,深圳518052

出　　处：《中华实验外科杂志》2016年第3期643-645,共3页Chinese Journal of Experimental Surgery

基　　金：国家自然科学基金（30801116/H1622）;深圳市南山区科技计划（2013034）

摘　　要：目的以曲妥珠单抗（TRA）为对照，观察二甲双胍（MET）对人类表皮生长因子受体（Her-2）阳性乳腺癌干细胞（BCSCs—HP）自我更新能力的影响。方法（1）以乙醛脱氢酶1（ALDH1）为标记，通过悬浮培养富集ALDH1阳性乳腺癌肿瘤干细胞（SC细胞）；（2）采用微球体形成试验、细胞计数试剂盒（CCK-8）法、Transwell侵袭试验研究二甲双胍对BCSCs．HP生物学行为及其自我更新能力的影响作用；（3）采用Westernblot方法检测分别应用TRA、MET及TRA＋MET干预BCSCs—HP（SC—TRA组，SC—MET组以及SC—MET—TRA组）后p21及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）蛋白表达的变化。结果SC—TRA、SC—MET、SC．MET—TRA组的干细胞比例分别为（29．17±2．06）％、（14．08±1．18）％，（8．12±0．42）％，微球体形成率分别为（17．85±1．87）％、（11．08±0．94）％、（6．57±0．52）％，同时干细胞的增殖与侵袭能力均降低，p21及mTOR蛋白表达明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论二甲双胍可以影响干细胞微球体的形成，抑制其体外增殖、侵袭及下调p21和mTOR蛋白的表达，抑制干细胞的自我更新能力。Objective To detect the effect on the ability of self - renewal of human epidermal growth factor receptor （Her- 2） positive breast cancer stem cells （BCSCs - HP） by metformin compared to trastuzumab （TRA）. Methods （ 1 ） Flow cytometry detect the proportion of aldehyde debydmgenase 1 （ALDH1） positive cells in UACC -732, breast cancer stem cells enriched by mammosphere; （2） To de- tect the effect on the biological behavior and the ability of self - renewal of BCSCs - HP by metformin, tras- tuzumab and metformin combined with trastuzumab （ SC - TRA group, SC - MET group and SC - MET - TRA group） with cell counting kit- 8 （CCK- 8） method, Transwell invasion test and stem cell micro- spheres formation test, respectively; （3） To explore the p21 and mTOR expression in the three teams a- bove by wester blotting. Results The proportion of ALDH1 positive cells in the three teams were （29. 17_＋2.06）%, （14.08 ± 1.18）%, （8.12 ± 0.42）% and the mammpsphere formation rate （ 17.85 ± 1.87 ） %, （ 11.08 ± 0. 94 ） %, （ 6. 57 ± 0. 52 ） % （ P 〈 0. 05 ）, respectively. The proliferative and invasive abilities of stem ceils were inhibited and the expression of p21 and mTOR protein decreased. Conclusion Metformin can inhibits the mammosphere formation and the self - renewal ability of Her - 2 positive breast cancer stem cells by downregulating the protein expression of p21 and roTOR.

关 键 词：乳腺癌干细胞 CerbB-2/neu 二甲双胍 乙醛脱氢酶1 p21 

分 类 号：R735.3[医药卫生—肿瘤]