缺血性脑卒中小鼠脑和血清中IL-17A的变化及其对缺血神经元的影响  

Changes of IL-17A in brain and serum and its effect on ischemic neurons of mice with ischemic stroke

作　　者：于津泠 李淑娟[2] 魏海萍[1] 朱弘倚 韩松[1] 李俊发[1] 

机构地区：[1]首都医科大学神经生物学系北京脑重大疾病研究院,北京100069 [2]首都医科大学附属朝阳医院神经内科,北京100020

出　　处：《基础医学与临床》2016年第4期456-461,共6页Basic and Clinical Medicine

基　　金：国家自然科学基金(81301015;31171147;31471142);北京市自然科学基金(7132070;7141001);IATN国际合作种子基金(PXM2015-014226-000051);北京脑重大疾病重点实验室课题(2015NZDJ05);2013年北京市新世纪百千万人才工程培养经费B类资助项目[北京市人事局(D08-016号)]

摘　　要：目的观察白介素-17A(IL-17A)在小鼠缺血性脑卒中血清和脑脊液的变化。在离体氧糖剥夺(OGD)模型和基因敲除小鼠中,进一步探讨IL-17A在神经元缺血损伤中可能的作用及其损伤途径。方法建立小鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)和脑皮层原代神经元氧糖剥夺(OGD)模型,用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测6及12 h和1、3及7 d的血清(n=7)、脑脊液和12 h梗死区周围皮层(n=5)IL-17A的含量,经5、10、100和500 ng/m L重组IL-17A(r IL-17A)处理后的野生小鼠(n=8)与未经r IL-17A处理的基因敲除小鼠原代神经元进行OGD(n=5),用MTS比色法和蛋白印迹方法检测其对缺血神经元的影响。结果 MCAO 1 h再灌12 h,梗死区周围脑皮层匀浆IL-17A升高(P<0.001),脑脊液中IL-17A在12 h达到高峰(P<0.05);MCAO 1 h再灌1 d,血清IL-17A开始升高,再灌3 d达到高峰(P<0.001);r IL-17A对常氧下神经元的存活率无明显影响,但其可呈剂量依赖性明显加重OGD损伤后神经元的存活率(P<0.05);OGD处理野生型(IL-17A+/+)小鼠脑皮层原代神经元,Beclin 1蛋白表达水平和Cl/pro-caspase 3的比值明显升高,缺乏IL-17A可以逆转OGD的作用(P<0.05)。结论缺血性脑卒中小鼠的血清和脑脊液中IL-17A呈现不同的变化规律,IL-17A可能通过神经元的自噬和凋亡途径加重神经元缺血损伤。Objective To explore the changes of interleukin-17 A（ IL-17 A） in cerebrospinal fluid（ CSF） and serum after ischemic stroke. To investigate its role in ischemic neuronal injury and its possible pathway.Methods Establish mouse cerebral artery occlusion（ MCAO） model and oxygen-glucose deprivation（ OGD）model with cortical primary neurons,and use enzyme-linked immunosorbent assay（ ELISA） to detect the level of IL-17 A in serum and cerebrospinal fluid at 6,12 h,1,3,7 d and per-infarct cortex homogenates at 12 h.With 5,10,100 and 500 ng / m L of recombinant IL-17 A（ r IL-17 A） and OGD treatment on wild-type mice（ n = 8） and without r IL-17 A treatment on knockout mice（ n = 5）,use MTS assay and Western blot to detect its effect on ischemic neurons. Results IL-17 A significately increased in per-infarct cortex homogenates（ P〈0. 001,n = 5） and CSF at 12 h after MCAO（ P〈0. 05,n = 5）,while in serum it began to increase at 1 d（ P〈0. 05,n = 5） and peaked at 3 d（ P〈0. 001,n = 7）; In vitro,r IL-17 A aggravated neuronal death in dose-dependent manner after OGD while it had no effect on neuronal death under normoxia culture（ P〈0. 05,n = 8）; The ratio of Cl / pro-caspase 3 and the Beclin 1 protein levels increased after OGD treatment. However,this effect could be reversed in lacking of IL-17 A after OGD treatment（ P〈0. 05,n = 5）. Conclusions IL-17 A in the serum and CSF after ischemic stroke show different change,and it plays an important role in aggravating neuronal injury possibly through autophagy and apoptosis pathways.

关 键 词：白介素-17A(IL-17A) 缺血性脑卒中 脑脊液(CSF) 氧糖剥夺(OGD) 小鼠 

分 类 号：R743.3[医药卫生—神经病学与精神病学]