靶向纳米复合物抗乳腺癌细胞增殖作用研究  

Targeting nano - gene delivery for breast cancer cell proliferation

作　　者：范伟[1,2] 王旭东[2] 蔡海敏[2] 杨玲[2] 李勇[1] 刘升辉[1] 聂岁锋[2] 卢绮萍[1] 

机构地区：[1]广州军区武汉总医院普通外科,武汉430070 [2]解放军第425医院药械科,三亚572000

出　　处：《中华实验外科杂志》2016年第4期879-883,共5页Chinese Journal of Experimental Surgery

基　　金：基金项目：国家自然科学青年基金（81402190）;中国博士后科学基金面上二等资助项目（2014M552711）;海南省自然科学基金（814392）;三亚市医疗卫生科技创新资助项目（YW1311）;海南省重点科技计划资助项目（ZDXM20110036）

摘　　要：目的通过构建具有CD44特异性靶向作用的基因载体硫代适体一聚乙二醇一聚酰胺胺（TA—PEG—PAMAM），携带具有抗乳腺癌细胞增殖作用的基因微小RNA（miRNA，miR）-145，观察载体系统的转染效率及其对乳腺癌细胞侵袭和转移的抑制作用。方法运用核磁共振（NMR），鉴定TA-PEG-PAMAM基因载体的结构；利用粒径电位仪对TA—PEG—PAMAM／miRNA纳米复合物进行表征；利用基因转染实验观察TA—PEG—PAMAM/miRNA纳米复合物在乳腺癌细胞MDA-MB-231（CD44^＋）和MCF-7（CD44^-）上的表达效果；利用细胞计数试剂盒（CCK-8）细胞增殖抑制实验，观察TA-PEG—PAMA彬miRNA-145对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的抑制作用。结果通过结构鉴定确定TA—PEG—PAMAM合成成功。定性定量转染效率实验考察证明，PEG修饰后的PAMAM对乳腺癌细胞转染效率差异无统计学意义（P〉0．05），经TA进一步修饰后对MDA-MB-231细胞转染效率增加，差异有统计学意义（P〈0．05），证明TA的靶向作用。CCK-8细胞增殖实验证明，TA-PEG-PAMAM／miRNA-145纳米复合物的半数抑制浓度（IC50）值[（121．3±14．9）nmol／L]低于阴性对照组[（261．5±30．2）nmol／L]，差异有统计学意义（P〈0．05），说明其对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移具有明显的抑制作用。结论TA—PEG—PAMAM／miRNA-145有望成为今后靶向治疗乳腺癌的基因药物。Objective Aim to construct a novel polymer gene delivery system based on a new kind of dendrimer - polyamidoamine （PAMAM）. With the modification of polyethylene glycol （PEG） and thio- aptamer （ TA）, TA - PEG - PAMAM/microRNA （miRNA） - 145 was successfully synthesized for treatment of breast cancer. Methods Nuclear magnetic resonance （NMR） was used to characterize TA -PEG- PAMAM. The diameter and zeta potential of complex was measured by Zetasizer Nano - zsg. The breast cancer distribution experiments were employed to explore its biological characteristics and breast cancer cell （ MCF -7 and MDA - MB -231 ） targeting ability. The inhibition of complex on MDA - MB -231 cell was determined by CCK -8 assay. Results NMR results demonstrated the successful synthesis of PAMAM - PEG - TA. The cellular uptake of vectors was concentration - dependent. The gene expression in vitro indi- catod that the modification of TA could increase the gene expression efficiency and CD44 targeting ability of PAMAM vectors to MDA - MB - 231 （ CD44 overexpressing breast cancer cells）. Conclusion TA - PEG - PAMAM/miRNA - 145 may prove useful for pre - clinical and clinical study on the treatment of breast cancer.

关 键 词：纳米载体 靶向治疗 乳腺癌 基因载体 CD44 

分 类 号：R730.5[医药卫生—肿瘤]