免疫促凋亡蛋白Immuno-caspase-6可选择性杀伤HER2阳性SGC-7901胃癌细胞  

作　　者：胡萍萍[1] 任君琳[2] 李玉芳[3] 陈旭[3] 席文锦[3] 杨安钢[3] 王涛[4] 崔立红[1] 

机构地区：[1]安徽医科大学海军临床学院,北京100048 [2]中国人民解放军海军总医院医务部,北京100048 [3]第四军医大学免疫学教研室,陕西西安710032 [4]第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室,陕西西安710032

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2016年第5期646-649,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金(81301702;81472633);海军总医院创新培育基金(CXPY201401)

摘　　要：目的构建融合白喉毒素转位序列的免疫促凋亡蛋白Immuno-caspase-6的真核表达载体,真核表达纯化该重组蛋白后验证其对人表皮生长因子受体2(HER2)阳性细胞的选择性杀伤活性。方法把Kozak序列与单链抗体e23sfv、白喉毒素的促转位片段白喉毒素弗林蛋白酶识别位点(fdt)、caspase-6以及免疫球蛋白Ig G Fc段基因重组,克隆入真核表达载体pc DNA3.1(+)中,命名为pc DNA3.1(+)-AFC。瞬时转染CHO-S细胞,Western blot法检测上清中目的蛋白的表达;收集培养上清并利用蛋白A纯化柱对目的蛋白进行纯化;流式细胞术验证目的蛋白对HER2阳性SGC-7901细胞的杀伤作用。结果成功构建pc DNA3.1(+)-AFR真核表达载体;瞬时转染悬浮CHO-S细胞后,Western blot法证实目的蛋白可分泌性表达于细胞培养上清中,流式细胞术结果显示纯化后的目的蛋白可以显著促进HER2阳性SGC-7901细胞凋亡。结论真核细胞表达的免疫促凋亡蛋白Immuno-caspase-6可选择性高效杀伤HER2阳性SGC-7901细胞。

关 键 词：人表皮生长因子受体2(HER2) e23sfv 胃癌 分子靶向治疗 

分 类 号：R735.2[医药卫生—肿瘤] R392.33[医药卫生—临床医学]