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机构地区:[1]中山大学光华口腔医学院附属口腔医院,广东省口腔医学重点实验室,广东广州510055 [2]武汉大学口腔医学院牙体牙髓科,湖北省口腔基础医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地口腔生物医学教育部重点实验室,湖北武汉430079
出 处:《口腔医学研究》2016年第5期460-463,469,共5页Journal of Oral Science Research
基 金:国家自然科学基金项目(编号:81300874);广东省医学科研基金项目(编号:B2013152,A2014255)
摘 要:目的:观察IL-21对人牙周膜成纤维细胞RANKL/OPG的表达以及增殖活性的影响,以及Notch信号通路在其中的作用,探讨IL-21在根尖周炎骨破坏中的作用机制。方法:使用不同浓度(0、10、50、100μg/L)的IL-21作用于人牙周膜成纤维细胞,并选择最佳刺激浓度IL-21(50μg/L)处理人牙周膜成纤维细胞,观察不同的时间点(0、12、24h),通过实时定量PCR和ELISA的方法检测细胞中RANKL/OPG的表达水平。同时使用实时定量PCR和Western-blot检测IL-21对人牙周膜成纤维细胞Notch1表达水平的影响。运用Notch信号的阻断剂GSI(5μmol/L)预处理人牙周膜成纤维细胞后,再检测IL-21对人牙周膜成纤维细胞RANKL/OPG的表达水平的影响。CCK8法测定各个实验组细胞增殖活性。结果:IL-21可显著提高人牙周膜成纤维细胞RANKL的表达水平,对OPG的表达无显著影响。IL-21显著抑制人牙周膜成纤维细胞的增殖活性。结论:IL-21通过Notch信号通路上调人牙周膜成纤维细胞的RANKL表达,抑制其增殖活性。Objective:To explore the effect of interleukin-21(IL-21)via Notch signal pathway on the expression of RANKL/OPG and proliferation in hPDLCs and to investigate the possible role of IL-21 in bone resorption of apical periodontitis.Methods:hPDLCs were treated with IL-21 in different concentrations(0,10,25,50μg/L).Then the optimal concentration(50μg/L)was used in the time-dependent experiment.The expressions of RANKL/OPG were detected by real-time PCR and ELISA.The expressions of RANKL/OPG were detected by real-time PCR and ELISA.Real-time PCR and western-blot were conducted to detect the expression of Notch1 in hPDLCs treated by IL-21.After pretreatment with GSI(5μmol/L)to inhibit Notch1 signaling pathway,the expressions of RANKL/OPG of hPDLCs treated with IL-21(50μg/L)were investigated.CCK8 was carried out to detect the proliferation activity in the different groups of hPDLCs.Results:The expressions of RANKL were significantly up-regulated by IL-21.IL-21 decreased the cell proliferation activity in hPDLCs.Conclusion:IL-21up-regulated the expression of RANKL and reduced proliferation activity in hPDLCs via Notch signal pathway.
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