过氧亚硝酸根联合碱性成纤维细胞生长因子对人晶状体上皮细胞细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化水平的影响  

Effects of peroxynitrite and basic fibroblast growth factor on level of ERK phosphorylation in human lens epithelial cells

作　　者：贾义[1] 宋萍萍[1] 苏朝[1] 

机构地区：[1]贵州医科大学生物与工程学院化学生物学教研室,贵州省贵安新区550025

出　　处：《眼科新进展》2016年第7期609-611,共3页Recent Advances in Ophthalmology

基　　金：国家自然科学基金资助(编号:21561006);贵州省科学技术基金资助(编号:黔科合J-2014-2028);贵阳医学院博士启动基金(编号:YJ2014-8);贵阳医学院2014年大学生创新创业项目(编号:201410660033)~~

摘　　要：目的探讨过氧亚硝酸根(peroxynitrite,ONOO^-)和重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,b FGF)共同作用对人晶状体上皮细胞细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化水平的影响。初步探讨ONOO^-导致白内障发生的可能机制。方法将培养的HLEC细胞分为4组,对照组(未经ONOO^-和b FGF处理)、b FGF单独处理组、b FGF+ONOO^-处理组[b FGF预处理1 h后加入不同浓度ONOO^-(50μmol·L^(-1)、100μmol·L^(-1)、200μmol·L^(-1))处理1 h]和ONOO^-+b FGF处理组[不同浓度ONOO^-(50μmol·L^(-1)、100μmol·L^(-1)、200μmol·L^(-1))预处理1 h后加入b FGF处理1 h]。检测各组细胞内ERK磷酸化水平的变化。结果 b FGF单独处理组和b FGF+ONOO^-(50μmol·L^(-1)、100μmol·L^(-1)、200μmol·L^(-1))处理组中磷酸化ERK相对表达值分别为5.17±0.35、4.42±0.12、3.91±0.15和0.49±0.08,与对照组(1.00±0.05)相比差异有统计学意义(F=402.83,P<0.001),结果显示ONOO^-可以抑制由b FGF诱导的ERK磷酸化水平的增加(F=310.34,P<0.05)。ONOO^-(50μmol·L^(-1)、100μmol·L^(-1)、200μmol·L^(-1))+b FGF处理组中磷酸化ERK相对表达值分别为3.36±0.04、3.32±0.06和2.92±0.08,与对照组(1.00±0.02)相比,所有处理组的ERK磷酸化水平均显著增加(F=518.94,P<0.001);50μmol·L^(-1)和100μmol·L^(-1)ONOO^-处理细胞后经b FGF处理,ERK磷酸化水平较b FGF单独处理组(3.04±0.05)显著增加(F=35.53,P<0.05),而200μmol·L^(-1)ONOO^-处理组与bF GF单独处理组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ONOO^-诱导的白内障的发生可能与ERK磷酸化的紊乱有关。Objective To discuss the effects of peroxynitrite（ ONOO-） and recombinant human basic fibroblast grow th factor（ bFGF） on the level of ERK phosphorylation（ p ERK） in human lens epithelial cells（ HLEC）,and investigate the mechanisms of ONOO-on the development of cataract. Methods HLECcell line SRA01/04 cells were cultured in DMEMmedium and treated with ONOO-and bFGF. Cells were divided into four groups： Control group（ treated without bFGF and ONOO-）; bFGF treatment alone group; bFGF ＋ ONOO-treatment group [HLECcells were treated with bFGF for 1 hour and then cultured with different concentrations（ 50 μmol·L-1,100 μmol·L-1,200 μmol·L-1） of ONOO-for 1 hour];ONOO-＋ bFGF treatment group [HLECcells were treated with different concentrations（ 50μmol·L-1,100 μmol·L-1,200 μmol·L-1） of ONOO-for 1 hour and then cultured with bFGF for 1 hour）. The levels of p ERK were assayed by Western blot. Results The levels of p ERK in bFGF treatment alone group and bFGF ＋ ONOO-treatment group（ 50 μmol·L-1,100 μmol·L-1,200 μmol·L-1ONOO-） were 5. 17 ± 0. 35,4. 42 ± 0. 12,3. 91 ± 0. 15 and0. 49 ± 0. 08,respectively,the difference of p ERK was statistically significant compared with the control group（ 1. 00 ± 0. 05）（ F = 402. 83,P 〈 0. 001）. The results show ed that HQ could inhibit the increase of p ERK induced by bFGF（ F = 310. 34,P 〈 0. 05）. The levels of p ERK in ONOO-（ 50 μmol·L-1,100 μmol·L-1,200 μmol·L-1） ＋ bFGF treatment group were 3.36 ± 0. 04,3. 32 ± 0. 06 and 2. 92 ± 0. 08,respectively,the difference of p ERK was statistically significant compared with the control group（ 1. 00 ± 0. 02）（ F = 518. 94,P 〈 0. 001）. and show ed that bFGF could increase the levels of p ERK induced by low concentrations of ONOO-（ 50 μmol·L-1,100 μmol·L-1）,which was higher than that in the bFGF treatment alone group（ F = 35. 53,P 〈 0. 01）,but there was no statistical difference between 200 μmol· L-1ONOO-treatment group and bFGF treat

关 键 词：人晶状体上皮细胞 过氧亚硝酸根 细胞外信号调节激酶 

分 类 号：R776[医药卫生—眼科]