基于XcmⅠ的T载体及其在合成生物学中的应用  

An XcmⅠ-generated T vector and its applications in synthetic biology

作　　者：段仰凯[1,2] 梁飞燕[1,2] 谈晓明[2] 吕雪峰[2] 

机构地区：[1]中国科学院大学,北京100049 [2]中国科学院青岛生物能源与过程研究所中国科学院生物燃料重点实验室,山东青岛266101

出　　处：《生物工程学报》2016年第7期956-965,共10页Chinese Journal of Biotechnology

基　　金：山东省自然科学基金(No.ZR2013CQ045)资助~~

摘　　要：为了节约成本和提高实验效率,以商用p MD18-T载体为基础,构建获得了p FL-XS-T载体,其具有符合Biobrick标准的串联XbaⅠ-XcmⅠ-XcmⅠ-SpeⅠ克隆序列,通过对XcmⅠ的酶切处理即可以通过TA克隆方便地克隆PCR片段。克隆验证实验结果表明,经XcmⅠ处理的该载体可以与PCR片段进行TA连接,连接效率及阳性率均可以满足实验室要求并且可以得到Biobrick标准质粒。此外,该载体不仅可以与其余Biobrick标准元件进行串联,还可以作为功能DNA元件的筛选载体。For more economical and efficient DNA clonging, p FL-XS-T, a Biobrick-T vector was constructed based on p MD18-T vector, carrying clonging regions of XbaⅠ-XcmⅠ-XcmⅠ-SpeⅠ. The results revealed that PCR products could be conveniently inserted into p FL-XS-T vevtor digested by XcmⅠby means of TA cloning. The positive frequency of recombination can meet the experimental requirements and all the plasmids obtained meet Biobrick standard. Moreover, the p FL-XS-T is compatible with other Biobrick parts, and serves as a vector for functional DNA fragments screening.

关 键 词：Biobrick标准 TA克隆 合成生物学 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]