TA克隆

作品数:70被引量:209H指数:9
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相关机构:郧阳医学院附属人民医院武汉大学安徽医科大学中国科学院更多>>
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新发突变单基因病家系产前诊断结果及复发性新发突变患儿的亲本来源分析
《中华医学杂志》2025年第6期452-458,共7页谢瑶君 陈松长 张丽 刘聪 傅元政 徐晨明 
国家重点研发计划(2023YFC2705600,2023YFC2705601,2023YFC2705603);上海申康医院发展中心“市级医院新兴前沿技术联合攻关项目”(SHDC12023120)。
目的分析新发突变(DNMs)单基因病家系产前诊断结果及复发性DNMs家庭患儿的突变亲本来源。方法本研究为横断面研究。纳入2021年1月至2023年12月于复旦大学附属妇产科医院行生殖遗传咨询和产前诊断的DNMs患儿生育史家系41个。收集产前诊...
关键词:产前诊断 新发突变 单基因病 靶向高通量测序 生殖腺嵌合 TA克隆 
中成药中全蝎掺伪DNA分子鉴定
《药物分析杂志》2024年第7期1267-1275,共9页段宝丽 尤春雪 蒋超 
国家自然科学基金项目(83073972);中国中医科学院中药资源中心自主选题研究项目(ZZXT202212)。
目的:建立有效检出中成药中细尖狼蝎成分的方法,检测获得中成药中全蝎掺伪情况。方法:收集《中华人民共和国药典》收载的30种含全蝎成分的中成药,提取DNA,比对线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列差异,分别设计全蝎源性和细尖狼...
关键词:中成药 全蝎 东亚钳蝎 细尖狼蝎 聚合酶链式反应 分子鉴定 TA克隆 系统发育树 
广东虫草邻氨基苯甲酸合酶基因克隆及不同实验条件下的表达被引量:1
《微生物学通报》2021年第6期1942-1951,共10页李敏 王刚正 邓旺秋 张成花 高宇 旺姆 李泰辉 
广东省科学院专项基金(2020GDASYL-20200103014);国家自然科学基金(31900015,31800012);广州市科技计划重点项目(201804020018)。
【背景】邻氨基苯甲酸合酶(TrpE)广泛存在于植物和微生物中,参与色氨酸和生长素的生物合成,在生长发育及胁迫响应过程中具有重要的作用。广东虫草(Tolypocladium guangdongense)是华南地区特有的一种极具开发价值的虫草资源。【目的】明...
关键词:TA克隆 生长发育 温度胁迫 差异表达 
一步法构建莱茵衣藻叶绿体表达载体
《现代农业研究》2021年第3期54-56,共3页刘国兴 胡玉立 徐丹丹 徐松 
为简化莱茵衣藻叶绿体表达载体构建步骤,将莱茵衣藻叶绿体中表达所需的DNA元件组合,构建入可一步TA克隆插入靶基因的载体pTBNK,可直接用于在莱茵衣藻叶绿体表达靶基因。将EGFP克隆至表达载体pTBNK,经蓝白班筛选获得阳性转化子pTBNK-EGFP...
关键词:莱茵衣藻 叶绿体 TA克隆 基因枪 
寻常疣和跖疣HPV型别及与临床特征关系的差异性被引量:21
《中国皮肤性病学杂志》2020年第11期1233-1237,共5页明星 李秀翠 董强 宗丽娜 尹萌萌 王泽锟 葛芸 李京 梁龙 吕世超 
首都临床特色应用研究(Z141107002514179)。
目的探讨寻常疣和跖疣患者的主要HPV型别及与临床特征关系的差异。方法记录患者的临床信息;使用PCR、基因测序和TA克隆技术检测HPV型别,分别采用构成比和组间、组内卡方检验比较寻常疣和跖疣患者的主要HPV型别及与临床特征关系的差异。...
关键词:人乳头状瘤病毒  临床特征 PCR TA克隆 
三种常见CD36基因突变体标准质粒的构建被引量:1
《检验医学与临床》2020年第12期1659-1661,1665,共4页陈尚良 刘正婷 黄佳丽 何海洪 黎绍昌 李立浩 
广东省深圳市科技计划(JCYJ20170307143728891);广东省深圳市宝安区科技计划(2016CX306)。
目的构建3种常见的CD36基因突变质粒,为建立高分辨率熔解曲线方法提供突变标准品。方法选取广州人群常见的CD36基因突变位点A1237C、C268T及329-330delAC作为研究位点,采用重叠延伸PCR方法及TA克隆技术构建含有上述突变位点的野生型和...
关键词:CD36基因 基因突变 重叠延伸PCR TA克隆 
产物可直接进行“TA”克隆的高保真PCR法
《安徽农业科学》2020年第5期109-111,116,共4页孙达权 张钦真 胡桐 湛钊 石松 薛殿婷 
国家自然科学基金项目(81560390);贵州省科学技术基金项目(黔科合基础[2017]1147);贵州省大学生创新创业项目(201710660034,2018520351)
[目的]介绍一种PCR产物直接进行“TA”克隆的高保真PCR法,减少高保真PCR产物“TA”克隆的中间步骤。[方法]Trizol法提取人肝癌细胞SMMC-7721总RNA,并将mRNA反转录成cDNA。以cDNA为模板,联合不同特性的Taq DNA聚合酶扩增PKC基因的蛋白编...
关键词:聚合酶链式反应 DNA聚合酶 “TA”克隆 DNA突变 
基于Eam1105Ⅰ酶切的p18K-T载体的构建
《分子植物育种》2019年第11期3579-3584,共6页周天顺 余东 董皓 孙志忠 孙学武 谭炎宁 盛夏冰 段美娟 袁定阳 
国家重点研发计划(2016YFD0101100);国家高技术研究发展计划(863计划)(2014AA10A604);湖南省农业科学院科技创新项目(2017ZD02);国家自然科学基金面上项目(3167166)共同资助
TA克隆是PCR产物克隆最简单的方法,而T载体的改良对提高TA克隆效率、简化克隆片段后续的酶切、连接等实验步骤有着十分重要的意义。本研究以pMD18-T载体为基础,将原有的氨苄青霉素抗性筛选标记基因替换成卡那霉素抗性筛选标记基因,克服...
关键词:TA克隆 pMD18-T载体 p18K-T载体 Eam1105Ⅰ限制性核酸内切酶 
重组质粒pGEM-HERV-K gag的构建与鉴定
《西南医科大学学报》2018年第5期398-400,448,共4页张宗彦 张雯 刘妙龄 贲亚琍 
中央引导地方科技发展专项资金项目(财教[2016]150号)
目的:构建pGEM-HERV-K gag重组质粒。方法:分离人外周血单核细胞,提取总RNA,逆转录得到cDNA,PCR扩增目的基因后回收并纯化目的基因,TA基因克隆方法构建重组质粒,并采用酶切和PCR进行鉴定。结果:以PBMC的cDNA为模板,PCR扩增获得446 bp的H...
关键词:HERV-Kgag基因 TA克隆 外周血单核细胞 
7份贵州禾香味鉴定及OsBADH2基因CDS差异分析被引量:1
《分子植物育种》2018年第13期4138-4142,共5页王丽丽 彭强 李佳丽 张大双 吴健强 姜雪 朱速松 
"十二五"农村领域国家科技计划课题(2014AA10A604-11);贵州省联合基金项目(黔科合LH字(2015)7074号);贵州省重大专项黔科(合重大专项字(2013)6023);贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑(2018)2298);省科研机构服务企业行动计划(黔科合服企(2014)4005);贵州省科学技术基金(黔科合J字(2015)2098号)共同资助
水稻OsBADH2基因功能丧失是稻米产生香味的内因。本研究对7份贵州禾和2份对照品种的香味性状进行物化鉴定,发现榕禾与2个对照品种为香稻,其余6份贵州禾都为非香稻。为解析贵州禾产生香味与OsBADH2基因的内在关系,通过TA克隆、测序分析...
关键词:水稻 TA克隆 序列拼接 香味 
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