猪博卡病毒VP1蛋白抗原表位分析及其克隆表达  

作　　者：张晶[1] 黄宝慧 刘雪岭[1] 库旭钢[1,2] 栗绍文[1,2] 何启盖[1,2] 毕丁仁[1,2] 孟宪荣[1,2] 

机构地区：[1]华中农业大学动物医学院,湖北武汉430070 [2]华中农业大学农业微生物国家重点实验室,湖北武汉430070

出　　处：《畜牧与兽医》2016年第9期96-99,共4页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金项目(31201942)资助

摘　　要：为研究猪博卡病毒(PBo V)VP1蛋白在血清学诊断中的作用,用DNAStar软件预测了PBo V NP08株(Gen Bank登录号KR014255.1)VP1蛋白的主要抗原表位,确定1-334个氨基酸为优势抗原表位区,构建重组质粒p ET32a-VP1,将其转化感受态细胞BL21(DE3),并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为56.7 ku的重组蛋白VP1,主要以包涵体形式存在。纯化后蛋白的Western blot结果表明,表达的VP1蛋白与临床阳性血清具有良好的反应性。用该蛋白包被ELISA板,检测10份临床感染PBo V的猪血清样品和3份未感染猪的血清,结果表明其具有很好的特异性,不与未感染猪的血清发生反应,为建立PBo V感染血清学诊断方法奠定了基础。

关 键 词：猪博卡病毒 VP1蛋白 抗原表位预测 原核表达 

分 类 号：S855.3[农业科学—临床兽医学]